DETERMINACIÓN DE RIBOFLAMINA POR FLUOROMETRIA.

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Una vez mencionado lo anterior se tiene que en la misma figura tenemos un comportamiento de H2O, CH3COOH, HCl, NaOH l cual fue el esperado

[pic 5]La mayoría de los compuestos que contienen anillos aromáticos proporcionan emisión fluorescente. Ciertos compuestos carbonílicos alifáticos y alicíclicos y estructuras de dobles enlaces también lo hacen. Sin embargo, su número es pequeño en comparación con el número de compuestos fluorescentes que contienen anillos aromáticos. La mayoría de los hidrocarburos aromáticos no sustituidos fluorescen con una emisión fluorescente creciente con el número de anillos y con su grado de condensación. Los anillos heterocíclicos más sencillos (piridina, furano, pirrol,...) no fluorescen pero las estructuras de anillos fusionados con más de dos anillos (quinolina, isoquinolina, indol) lo hacen con frecuencia.3

De acuerdo a lo anterior a un pH acido la riboflavina se encontrará en su forma aniónica, y con ello se tiene un cambio en el número de estructuras resonantes lo que disminuye la estabilidad de su estado exitado.4

En el caso contrario a pH alcalino un factor que ocasiona que la fluorescencia se apague, es que ahí la riboflavina hidroliza al compuesto lo que hace que se pierda la estructura de su grupo funcional y con ello no tenga fluorescencia.

Por supuesto, la relación de mérito entre el método de fluorescencia y el de absorción dependerá de varios factores, entre ellos: la eficiencia cuántica de fluorescencia del analito en cuestión, su absortividad molar, la precisión (en miliabsorbancias) del espectrofotómetro disponible, la sensibilidad del fluorómetro.5

Cuestionario.

- ¿Por qué se deben conocer las longitudes de onda de máxima excitación y de máxima emisión?

Se debe determinar a que longitudes de onda se va a trabajar por eso se asegura que se tenga la máxima sensibilidad tomando en cuenta las longitudes de onda de excitación y emisión.

- Diga cuáles son las formas coenzimáticas de la riboflavina y cuál es su papel en el metabolismo celular.

La vitamina B2 o riboflavina al fosforilarse se convierte en su forma activa o coenzimática: dinucleótido de flavina y adenina (FAD), coenzima que transfiere átomos de hidrógeno; interviene en las oxidorreducciones, para la producción de energía. 6

- ¿Qué es la fosforescencia?

La fosforescencia es un fenómeno similar al de fluorescencia, en el cual ciertos electrones son excitados por la luz, pasando a una órbita de mayor energía, y cuando vuelven a su estado de reposo, liberan parte de esta energía en forma de luz. La diferencia entre ambos fenómenos es que en la fosforescencia la liberación de energía por medio de fotones sucede con retraso, aun cuando la fuente estimulante ya no está presente, al contrario de la fluorescencia, en el cual la liberación de fotones es casi inmediata a su absorción.7

Conclusiones

De acuerdo al pH del medio se tendrán distintas intensidades de fluorescencia.

A bajas concentraciones se tiene una mayor sensibilidad del método.

La fluorescencia está en función de las estructuras de anillos fusionados de las moléculas.

Bibliografía:

- http://www.uach.mx/extension_y_difusion/synthesis/2009/08/20/espectrometria_de_flourescencia_de_rayos_X.pdf

2, 5) http://www.qi.fcen.uba.ar/materias/ai/laboratorio/Fluorometria_2011.pdf

3,4)http://repositorio.innovacionumh.es/Proyectos/P_22CursoMateriales/Miguel_Angel_Sogorb/Wimba/Espectroscopia_06.htm

6) http://www.lincargentina.org/tratamiento-coenzim%C3%A1tico/

7) http://quimica.laguia2000.com/conceptos-basicos/fosforescencia