El quitosano

...

El presente comunicado describe la producción y propiedades fisicoquímicas obtenidas por la permentacion de M. rouxii en tres diferentes medios.

Materiales y métodos.

Materiales.

M. rouxii (MTCC 386) usados en este estudio fueron obtenidos desde el Institute of Microbial Technology, Chandigarh, Indiay mantenido en agar papa dextrosa. Productos químicos y bioquímicos se adquirieron de E. Merck y la melaza se obtiene de mercado local.

Medio de fermentación.

Se usaron tres medios de fermentación para este estudio y producción de quitosano para M. rouxii

MSM

Este medio contiene 0.2% NaNO3, 0,1% K2HPO4, 0,001% FeSO4, 0,001% MgSO4, 0,2% extracto de levadura y molasses como recurso de carbono. La melaza se añadió a los medios para obtener concentraciones de sacarosa que varían de 2 a 5%.

YPG

YPG fue hecho con extracto de malta 0,3%, pestona 1% y glucosa 2%.

Caldo papa dextrosa (PDB)

PDB contenía extracto de para 20% y dextrosa 2%. El pH de todo el medio fue ajustado a 5.0 y 50ml de cada medio se añadió a un matras Erlenmeyer a 250ml y autoclavados a 121ºC por 15 min.

Preparación de inoculo y fermentación.

El inoculo fue preparado por crecimiento de organismos en placas de PDA a 30ºC por 3 dias. Matras que contenían el medio fueron inoculados ccon un micelio de 5mm de diámetro conteniendo 6.4x 106 sporas/disco fueron usados como inoculo e incubado a 30ºC bajo la condición sumergida (120 rpm) por diferentes periodos de tiempo. Al final de el periodo deseado de incubación del micelio fueron se cosecharon por filtración, se secó por liofilización y se pesaron. Micelios y filtrados de cultivo fueron almacenadas a -20 ◦C hasta su uso.

Aislación de quitosano

Micelio (biomasa) fueron autoclavados a 121ºC por 15min después de homogenización en un licuadora con 1N NaOH (1:40, W/V). La masa insoluble alcalino se lavó a fondo con agua seguida de etanol y se calentó a reflujo con 100 volúmenes de 2% AcOH (v/V) por 24 h a 95ºC. La suspensión se centrifugó a 12.000 rpm en una centrífuga refrigerada Sorvall RC 5B durante 45 minutos a 4 ◦C. quitosano fue precipitado del sobrenadante mediante el ajuste de pH a 8.5 con 1N NaOh; se lavó varias veces con agua fría y se trituró con acetona.

Estimación de sacarosa

Sacarosa fue estimada por un método de fenol ácido sulfúrico

Determinación del grado de desacetilacion

El DD de quitosano fue determinado en primer lugar método espectroscópico UV derivado usando Shimadzu (opción programa/interface OPI-4) UV-Vis espectrofotómetro de registro UV 240 graphtcord [Velocidad de escaneado rápido, Ancho de la ranura 2 nm, el alcance de detección 190-240 nm]

Determinación del peso molecular promedio en peso

Las soluciones de quitosano varían sus concentraciones en los rangos de 0.0625 a 1,00% fueron preparadas con 2% de AcOH. La viscosidad de la solución fue mediada con un …

Resultados y discusión