.Cromatografía de intercambio iónico

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-El tiempo de contacto: Un ejemplo del tiempo que se requiere es que el ión sodio se intercambia casi instantáneamente en una resina solfónica, mientras que el ión amonio cuaternario necesita por lo menos una semana.

Usos

Puede ser usada en casi cualquier tipo de molécula cargada, incluyendo grandes proteínas, pequeños nucleótidos, purificación específica de productos biológicos y de sustancias inorgánicas y aminoácidos. La solución que debe inyectarse es usualmente llamada "muestra" y los componentes separados individualmente son llamados analitos. . Es una poderosa técnica para determinar bajas concentraciones de iones y es especialmente útil en estudios sobre el medio ambiente y la calidad del agua, entre otras aplicaciones. Es usada a menudo en purificación de proteínas

Ejemplo de Método de separación de CII.

Separación de proteínas

Las proteínas tienen numerosos grupos funcionales que tienen cargas positivas y negativas. La cromatografía de intercambio iónico separa las proteínas de acuerdo a su carga neta, la cual depende la composición de la fase móvil. Ajustando el pH o la concentración de iones de la fase móvil, varias moléculas de proteína pueden ser separadas. Por ejemplo, si la proteína tiene una carga positiva con un pH de 7, entonces puede unirse a una columna cargada negativamente, mientras que una proteína con carga negativa no lo podría hacer. También podría eliminarse cambiando el pH para que la carga neta de la proteína sea negativa.

La elución por el cambio de la fuerza iónica en la fase móvil tiene un efecto más sutil, trabaja como iones de la fase móvil interactuando con los iones inmovilizados en preferencia sobre estos en la fase estacionaria. Estos "escudos" de la fase estacionaria de la proteína, (y viceversa), y permite a la proteína eluirse.

Cromatografía de intercambio iónico:

La retención esta basada en la atracción entre iones del soluto y la carga complementaria de la faseestacionaria. Si los iones del soluto y la fase estacionaria tienen la misma carga, son excluidos. Algunosintercambiadores de iones son:

Resinas de Poliestireno: permite entrecruzamientos que dan estabilidad a la cadena.

Celulosa: Tiene tamaño de poros mas grandes y bajas densidades de carga que los hacen ideales para la

separación de proteínas.

Poro controlado de vidrio o silicona porosa.

Los intercambiadores de iones favorecen la unión de iones de mayor carga y radio inferior. Unincremento en el contra-ión (con respecto a los grupos funcionales de resinas) reduce el tiempo deretención. Un incremento del pH reduce el tiempo de retención en el intercambio catiónico, pero bajar elpH reduce la retención en intercambio aniónico.

Se usa en la purificación de agua, preconcentración de componentes traza, cromatografía deintercambio de ligandos, cromatografía de intercambio de iones de proteínas, intercambio de aniones aalto pH de carbohidratos y polisacáridos.

http://es.scribd.com/doc/11642417/Cromatografia-Fundamentos-y-Aplicaciones