POL2A

Las plantas muestran una variedad de alteraciones en el desarrollo tales como tamaño reducido y esterilidad parcial.

Consistentemente, POL2A-RNAi no mostró constitutivo regulación positiva de los genes DDR (Fig. 5E), lo que sugiere que los niveles adecuados de POL2A son esenciales para activación transcripcional desencadenada por la replicación punto de control de estrés.

No activar la respuesta adecuada tras la replicación el estrés puede provocar el colapso de la horquilla y, por lo tanto, generar DSB que en consecuencia desencadenan la activación del cajero automático.

En resumen, estos resultados sugieren que la presencia de POL2A mutado en la horquilla de replicación afecta a la célula progresión del ciclo, lo que lleva a un aumento en la fase S longitud debido a la activación del punto de control que confiere tolerancia a HU, mientras que la concentración reducida de POL2A impide la activación adecuada del punto de control en respuesta a estrés replicativo.

En conjunto, nuestros resultados indican que POL2A desempeña un papel en la activación del punto de control del estrés replicativo tanto en tejidos somáticos como reproductivos, pero que los eventos de señalización difieren entre los diferentes tipos de células.

DNA Pol se requiere no solo para la síntesis de ADN per se durante la replicación del ADN, sino también para la detección de estrés de replicación. Esta doble función está bien establecida en la levadura y probablemente se conserve en los animales, pero la investigación detallada se ha visto obstaculizada por la letalidad de los mutantes deficientes en su subunidad catalítica.

Uno de los elementos clave durante la respuesta al estrés de la replicación es la activación de la biosíntesis de nucleótidos por parte del RNR que en la levadura se ha demostrado que depende de Pol.

MATERIA VEGETAL

Las semillas se esterilizaron superficialmente mediante tratamiento con bayocloro durante 20 min, luego se lavaron y se embebieron en agua estéril durante 2 a 4 días a 4°C para obtener una germinación homogénea. Las semillas se sembraron en medio 0,53 Murashige and Skoog (MS) comercialmente disponible (Basalt Salt Mixture M0221; Duchefa) con el antibiótico apropiado si era necesario y se solidificaron con agar al 0,8 % (Phyto-Agar HP696; Kalys), y se cultivaron en un largo d ( 16 h luz, 8 h noche, 21°C) cámara de crecimiento. Después de 2 semanas, las plantas se transfirieron al suelo en un invernadero en condiciones de día corto (8 h de luz a 20 °C, 16 h de noche a 18 °C) durante 2 semanas antes de transferirlas a condiciones de día largo.