Técnica Histológica

T é c n I c a    H I s t o l ó g I c a[pic 1]

TÉCNICA HISTOLÓGICA: Procedimientos aplicados a un material biológico con la finalidad de prepararlo y conferirle las condiciones óptimas para poder observar, examinar y analizar sus componentes morfológicos a través de los microscopios fotónicos y electrónicos.

Procedimientos Inmediatos o Vitales

Observación y estudio de protozoarios, células… suspendidas en los líquidos de su habitad natural o solución salina balanceada.

Coloración Vital: Destacar alguna estructura celular o tisular, empleando colorantes inocuos que no modifiquen su estructura ni interfieran en sus funciones.

• Coloración Inravital: administración de colorantes a través de la vía digestiva o intratraqueal (inyecciones).
• Coloración Supravital: colorantes que se aplican a células o tejidos provenientes de organismos vivos.

Procedimientos Mediatos o Postvitales

Preparar células, tejidos y órganos de seres en los que los procesos vitales se han detenido y es necesario conservar la estructura que tenían en vida.

1. Toma de la muestra
2. Fijación
3. Inclusión
4. Microtomia
5. Coloración o tinción
6. Montaje.

TOMA DE LA MUESTRA[pic 2][pic 3]

BIOPSIA: toma de un fragmento de tejido u órgano de un ser vivo a través de una intervención quirúrgica para posteriormente llevar a cabo su estudio y corroborar así un diagnóstico.

NECROPSIA: muestras de seres muertos (obtención inmediatamente después de producida la muerte).

FIJACIÓN[pic 4][pic 5]

Proceso que detiene la vida de las células e impide las modificaciones post morten, manteniendo las características morfológicas de esta. Se efectúa mediante “fijadores” (líquidos, solidos o gaseosos).

a) Oxidantes: tetraóxido de osmio (ácido ósmico), bicromato de potasio, ácido crómico, bicloruro de mercurio o “sublimado corrosivo”, ácido pícrico, ácido acético.

b) Reductores: formaldehído, glutaraldehído, alcohol etílico, alcohol metílico.

[pic 6]Acción oxidante o reductora: confiere a las células condiciones que posibilitan la aplicación de las sustancias colorantes.

Fijadores simples: un solo compesto.

Fijadores compuestos: mezcla de varias soluciones fijadoras

[pic 7]Criterios para obtener una buena fijación

• Elección del fijador.
• Tamaño de las muestras.
• Volumen del fijador.
• Tiempo de fijación temperatura de la fijación.
• Almacenamiento de las muestras.
• Lavado de las muestras.

INCLUSIÓN[pic 8][pic 9]

Método para endurecer el tejido mediante “sustancia de inclusión” a fin de facilitar los cortes para el estudio por secciones.

INCLUSIÓN EN PARAFINA (insoluble en agua y alcohol)

• Deshidratación: extraer o remover el agua de los tejidos fijados.
• Impregnación en el solvente (aclaración o diafanización)
• Inclusión y formación del bloque de parafina (blandas 45°C - 52°C / semiduras 54°C - 58°C / duras 60°C - 65°C).

MICROTOMIA (OBTENCIÓN DE LOS CORTES) [pic 10][pic 11]

Proceso de corte de los tejidos endurecidos, los cuales se ejecutan con la ayuda de un instrumento denominado microtomo.