Analizadores de orina

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La metodología de análisis de partículas de orina se inició con la introducción de microscopios automatizados y citometría de flujo dispositivos inspirados en el recuento de células de sangre [1] . Estos analizadores utilizan dos principios analíticos para el análisis de sedimento de orina, una basada en la impedancia eléctrica, y el otro depende de los sistemas de análisis basados en imágenes que las partículas tipo de acuerdo con dimensiones de partícula preestablecidos. Actualmente, no es claro qué principio es superior.

Los sistemas de análisis basados ​​en imágenes escanear automáticamente los elementos formes de la que fluye la orina y mostrar las imágenes de elementos formados en una pantalla. Antes de informar de los resultados de los análisis, los elementos conformados deben ser examinados visualmente por el personal bien entrenado que pueden decidir aprobar, eliminar o reclasificar ellos. Sin embargo, los laboratorios que han hecho la transición del método microscópico manual para sistemas automáticos todavía tienen algunas preocupaciones acerca de la concordancia de los resultados.

El uso de los analizadores automatizados (Iris iQ200 ELITE y DIRUI FUS-200) ha ido aumentando en los laboratorios médicos. Estos analizadores son ambos sistemas de análisis basados ​​en imágenes y no ha habido ningún estudio publicado la comparación de los dos instrumentos. Se evaluó la concordancia entre la microscopía manual y los dos analizadores automáticos de sedimento de orina.

2. Materiales y métodos

209 pacientes seleccionados al azar que asistieron al laboratorio de nuestro hospital se estudiaron. Todos los pacientes dieron su consentimiento por escrito firmado antes de la inscripción en el estudio, y el estudio se realizó de conformidad con la Declaración de Helsinki (Principios éticos para las investigaciones médicas en seres humanos).

La recogida, transporte, preparación de muestras y análisis de orina se realizó de acuerdo a las directrices europeas análisis de orina [1] . Muestras de medio de la corriente (30 ml) se recogieron en recipientes primarios que no tenían riesgo de derrame, que se transportan en los contenedores primarios y se transfirieron a recipientes secundarios (tres tubos cónicos de diferentes) en el laboratorio. Los tubos secundarios fueron translúcido para permitir una visión clara de la muestra. 10 ml de la muestra de orina se añadió a cada tubo. Cada muestra se examinó en una hora por los tres métodos. El primer tubo se centrifugó durante 5 min a 1500 rpm (400 g) para el examen microscópico manual. Se decantó el sobrenadante hasta 0,5 ml de orina se mantuvo en la parte inferior del tubo. El sedimento se resuspendió, y luego una gota de sedimento se colocó en un portaobjetos de microscopio, cubierta con un cubreobjetos y se examinaron mediante microscopio de luz. La evaluación de los elementos de orina formada fue realizada por un especialista en bioquímica y un biólogo, de forma independiente utilizando el mismo portaobjetos de microscopio. Durante el examen, al menos 10 campos microscópicos diferentes fueron escaneadas a aumentos de × 100 y 400 × (por campo de baja potencia; LPF y por campo de alta potencia; HPF). Los resultados se calcularon el promedio de los elementos formados y se informaron como células o partículas en un campo. Si había una inconsistencia entre los resultados de los dos evaluadores, el análisis se repitió con otra muestra con el fin de resolver la discrepancia.

La evaluación de la orina formada elementos en los otros dos tubos (sin centrifugar) se llevó a cabo en el Iris iQ200 ELITE (Iris Diagnostics, Chatsworth, CA, EE.UU.) y DIRUI FUS-200 (DIRUI Industrial Co., Changchun, China) analizadores de sedimento de orina automática . Los resultados de los instrumentos se obtuvieron como media de elementos formados por LPF y HPF. El principio analítico del analizador DIRUI FUS-200 es la imagen digital celda de flujo y la identificación utilizando una técnica de inteligencia artificial. El principio analítico del analizador Iris iQ200 ELITE es la tecnología de flujo de morfología digital utilizando el software de reconocimiento automático de partículas (APR). A medida que la orina pasa a través de la celda de flujo, la orina es iluminado por una fuente de luz especial, y las imágenes son grabadas por una cámara digital se coloca en el ocular del microscopio y se transmite a la computadora. El software clasifica estas imágenes y las visualiza en la pantalla para el operador. El operador acepta, cambia o elimina estas imágenes de sedimentos.

Para determinar los coeficientes de variación de entre la marcha de imprecisión, se utilizaron los resultados de los controles positivos (control positivo DIRUI FUS-200 y control de iris iQ200 positiva) en lugar de las muestras de orina nativas (por razones de estabilidad) más de 20 días. Intraserie imprecisión se determinó utilizando dos muestras de orina combinados diferentes con diversas concentraciones de eritrocitos, leucocitos y células epiteliales probados en 20 carreras con cada analizador. Los resultados se expresaron como el número de particules / HPF.

Los análisis estadísticos se realizaron mediante SPSS 20.0 (Statistical Package for the Social Sciences versión 20.0, IBM Corporation, Armonk, Nueva York, EE.UU.) y Excel 2007 (Microsoft, Seattle, WA, EE.UU.) programas. Eritrocitos, leucocitos y células epiteliales se clasificaron semi-cuantitativa (0-5, 6-10, 11-20,> 20 células / HPF). Las bacterias, levaduras, moldes y cristales fueron clasificados como negativos o positivos.Los elementos semi-cuantitativos también se clasificaron como resultados positivos o negativos y positivos son los que superan los valores de corte, definida como 5 / HPF para los leucocitos, eritrocitos y células epiteliales.

Coeficiente kappa de Cohen se calculó la concordancia entre los métodos [6] . Los valores de coeficiente kappa de Cohen de 0 a 0,21, 0,21 hasta 0,40, 0,40-0,60, 0,61-0,80 y 0,81-1,00 se caracterizan por ser mala, regular, moderado, bueno, y muy buen acuerdo, respectivamente [7] . Se calcularon las tasas de concordancia dentro del mismo grado. Se evaluaron la sensibilidad analítica, especificidad y valor predictivo positivo y negativo para el analizadores automatizados en relación con el examen microscópico manual.

3. resultados

La imprecisión intraserial para los eritrocitos, leucocitos y células epiteliales (CV%, media, ± desviación estándar de las muestras de orina combinados) de la FUS-200 e Iris iQ200 fue del 4,9% (73,3 ± 3,6 partículas / HPF) y 5,0% (161,5 ± 8.1 partículas / HPF), respectivamente. La inter-ensayo