EVALUACIÓN DE LA CALIDAD MICROBIOLÓGICA DEL AGUA POR LAS TÉCNICAS DE FILTRACIÓN POR MEMBRANA Y NÚMERO MÁS PROBABLE (NMP)

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La técnica de Filtración por Membrana permite estimar la concentración de coliformes y de E. coli a través del conteo de colonias originadas a partir de la siembra, en agar chromocult, de la membrana implementada para filtrar. Esta permite la retención de microorganismos gracias a la posesión de poros de alrededor de 0,45 µm, que impiden el paso de coliformes y otros microorganismos que puedan estar presentes y cuyo tamaño exceda el del poro. Para la muestra de agua evaluada, la carga de coliformes fue tan elevada, que no fue posible estimar la cantidad de unidades formadoras de colonias; hubo presencia de tantas colonias en el agar, que su conteo no pudo ser llevado a cabo para realizar el cálculo correspondiente y tuvo que ser reportado como TNTC3.

El agar chromocult es un medio selectivo, que permite la identificación de coliformes y de E.coli gracias a la presencia de compuestos cromógenos tales como el Salmón-Gal y el X-glucorónido. Cada uno de estos sustratos responde a la actividad de una enzima particular: la β-galactosidasa y la β-D-glucoronidasa, respectivamente. Las colonias que crecieron en el medio inoculado con el filtrado de la muestra de agua presentaron una coloración azul-violeta, la cual indicó que se trataba de E.coli. La explicación a esto se encuentra en el fundamento del agar: la β-galactosidasa, que es sintetizada para metabolizar lactosa, se une al Salmón-Gal generando una coloración roja, y la β-D-glucoronidasa, producida para metabolizar carbohidratos complejos, al x-glucorónico dando una coloración azul. Al presentar ambas enzimas, las colonias de E.coli expusieron una coloración azul-violeta6.

Es importante resaltar que Pseudomona sp. podría asimismo haberse encontrado en la muestra, debido a que es habitante común de zonas húmedas, aguas y suelo, pero el agar implementado impidió el crecimiento de colonias de este género, lo que se hizo imposible determinarlo. Específicamente, la cefsulodina presente en el agar Chromocult inhibió el desarrollo de Pseudomonas aeruginosa, la más común de las Pseudomonas, gracias a su efecto antibiótico7y8.

Otra característica de E. coli que contribuye a su diferenciación es el ser positiva para la prueba indol. Esto supone que este grupo es capaz de degradar triptófano a través de una hidrólisis del mismo llevada a cabo por las enzimas triptofanasas. Como resultado del proceso, se produce indol, amoniaco y ácido pirúvico. El indol reacciona con el p-dimetilaminobenzaldehído, principio activo del reactivo de Kovac’s, dando como resultado la formación de un complejo coloreado9.

Los resultados obtenidos mediante ambas técnicas sugieren que el agua evaluada presenta altas concentraciones de coliformes y de E. coli. La presencia de E. coli es un indicador de que la muestra de agua que fue evaluada presenta contaminación fecal, un resultado esperado debido a que se obtuvo de un tejado al que tienen acceso gatos y otros animales que depositan sus desechos con esta carga microbiana. Este resultado puede ser perjudicial para ciertas comunidades sin facilidad de acceso al agua potable, que utilizan el agua de lluvia en el tejado para realizar tareas del hogar, ya sea como cocinar, limpiar etc. Por lo que la presencia de estos microorganismos representa una amenaza a su salud.

4. CONCLUSIONES

- Con respecto a la eficiencia de las dos técnicas, el método de filtración por membrana es más útil para el recuento de coliformes totales y E. coli; y por ende para determinar la calidad del agua debido a que da una mayor aproximación a la cantidad de estos microorganismos que la técnica NMP.

- La presencia de bacterias Coliformes y E. coli son indicadoras de contaminación; por ende, la cantidad de patógenos en el techo de la zona residencial evaluada, indica que hay alto riesgo de contaminación o enfermedad al tener contacto con estas aguas.

5. REFERENCIAS

- DETERMINACIÓN DE ESCHERICHIA COLI Y COLIFORMES TOTALES EN AGUA POR EL MÈTODO DE FILTRACIÒN POR MEMBRANA EN AGAR CHROMOCULT (2007) ideam.gov.co. Recuperado de: http://www.ideam.gov.co/documents/14691/38155/Coliformes+totales+y+E.+coli+en+Agua+Filtraci%C3%B3n+por+Membrana.pdf/5414795c-370e-48ef-9818-ec54a0f01174

- Imagen 1 (2017) Elaborado por: Lina Guevara,Valentina Echeverry, Joaquín Gómez.

- Chapter 10 - MICROBIOLOGICAL ANALYSES. (1996). Who.int. Recuperado el 10 de abril del 2017, de: http://www.who.int/water_sanitation_health/resourcesquality/wqmchap10.pdf?ua=1

- Universidad de Salamanca (s.f.) Coliformes Totales: Filtración a través de membrana. Coli.usal.es. Recuperado el 10 de abril del 2017, de: http://coli.usal.es/Web/demo_fundacua/demo2/FiltraMembColiT_auto.html

- (s.f.) Fluorocult LMX Broth modified. Merck Microbiology Manual, (12), 1. Recuperado el 10 de abril del 2017 de: http://www.mibius.de/out/oxbaseshop/html/0/images/wysiwigpro/Fluorocult_LMX_Broth_modif_110620_engl.pdf

- IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS INDICADORES Y DETERMINACIÓN DE PUNTOS DE CONTAMINACIÓN EN AGUAS SUPERFICIALES PROVINIENTES DEL CEMENTERIO JARDINES DEL RECUERDO EN EL NORTE DE BOGOTÁ (Pregrado). (2006). Pontificia Universidad Javeriana.

- Kasper, D., Fauci, A., Hauser, S., Longo, D., Lamerson, J., & Loscalzo, J. (2016). Harrison. Principios de Medicina Interna (19 ed., p. Capítulo 189: Infecciones por Pseudomonas y microorganismos relacionados). McGRAW-HILL INTERAMERICANA EDITORES, S.A.

- Gorostiaga, E. INTERACCIÓN DEL SUPLEMENTO SELECTIVO E.COLI/COLIFORMES CON 1 FILTROS DE MEMBRANA. ielab.es. Recuperado el 10 de abril del 2017, de: https://www.ielab.es/sites/default/files/Gipuzkoa.pdf

- MacFaddin. (2000). Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de importancia clínica (3era ed., pp. 205-207). Argentina: Médica Panamericana.