Informe de Microbiologia “TINCIÓN SIMPLE Y TINCIÓN GRAM”

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Tabla 2: Bacterias Gram+ y Gram –

Nombres

Lactobacilos

Bacterias

Coliformes

GRAM +

+

+

GRAM -

-

Elaborado por: Llamuca, A ; (2014)

Fuente: Laboratorio de Microbiología I ; FCIAL

DISCUSION

Al realizar la practica con las diferentes técnicas de tinciones como fueron la tinción simple y la tinción de Gramm se observó en los diferentes cultivos microbiologicos, como en la tinción diferencial de Gram, se identificó si la bacteria era Gram + o Gram- dando como resultado que las de tipo coliforme con una morfologia de baston y de color roso o rosado lo que indico que era Gram. Por otra parte en la misma tinción Gram, la bacteria Lactobacilius y otra bacteria desconocida resultaron positivas en esta prueba ya que presento el lactobacilius de forma alargada de barra, y la bacteria en forma esférica similar a los de tipo coco, ambos se tiñeron de color azul o violeta ya que es color característico de las bacterias Gram´+ ya que las moléculas de cristal violeta, lugol y ácido teicoico que se forma en su pared celular es muy difícil de remover.

Las células fijadas al calor sobre un portaobjetos se tiñen, primero con una solución de cristal violeta (otros colorantes básicos no son tan efectivos) y son lavadas después para quitar el exceso de colorante. En este estado, todas las células, tanto las grampositivas como las gramnegativas, están teñidas de azul.

Permite observar la forma, tamaño y agrupamiento de las bacterias usando un único colorante. Se utiliza un solo colorante, por lo que todas las estructuras celulares se tiñen con la misma tonalidad. El Hidróxido de potasio al 10% (solución de KOH) permite ver elementos de hongos ya que el KOH digiere parcialmente los componentes proteicos, por ejemplo de la célula huésped, pero no actúa sobre los polisacáridos de las paredes celulares de los hongos.

CUESTIONARIO

- ¿Por qué se utilizan colorantes básicos en la tinción simple? Nombre 3 ejemplos.

Los colorantes más utilizados son colorantes básicos, la parte que proporciona el color está cargada positivamente. Se utilizan estos colorantes porque las células bacterianas están débilmente cargadas en su superficie con cargas negativas. Ejemplos: Safranina, Azul de metileno y Lugol.

- Señalar las diferencias entre la tinción simple y la tinción diferencial de Gram.

Tinción de Gram: es un sistema de dos tinciones simples sucesivas, separadas por una fase de decoloración selectiva. Permite diferenciar las bacterias que retienen el primer color (Gram-positivas) de las que no lo retienen (Gram-negativas). Esta diferencia en comportamiento refleja diferencias estructurales y fisiológicas entre ambos grupos de bacterias.

Tinción simple: Permite observar la forma, tamaño y agrupamiento de las bacterias usando un único colorante (normalmente básico). Se utiliza un solo colorante, por lo que todas las estructuras celulares se tiñen con la misma tonalidad (Tinta china, Azul Metileno de Loeffler, Azul de lactofenol). El Hidróxido de potasio al 10% (solución de KOH) permite ver elementos de hongos ya que el KOH digiere parcialmente los componentes proteicos, por ejemplo de la célula huésped, pero no actúa sobre los polisacáridos de las paredes celulares de los hongos.

- ¿Cuál es la función del lugol y del alcohol en la tinción Gram?

LUGOL: La función del yodo- lugol, funciona como fijación de la preparación, y tambien actua sobre la pared de las bacterias Gram(+) de tal manera ke al agregar el decolorante (alcohol-cetona) no se destiñan las bacterias ke ia se tiñeron, al agregar la Safranina, las restantes bacterias se teñiran, siendo estas ultimas Gram (-).

ALCOHOL: El peptidoglucano es el material que confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las Gram positivas lo poseen en mucha mayor proporción que las Gram negativas. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen de manera distinta debido a estas diferencias de su pared.La diferencia en la resistencia a la decoloración, es debido a que la membrana externa de las Gram negativas es soluble en solventes orgánicos, como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona.

- Escriba las diferencias entre las bacterias Gram positivas y Gram negativas y 2 ejemplos de cada grupo.

- Gram positivos - Pared celular con grueso peptidoglicano que retiene un colorante específico. No tienen membrana externa.

Ejemplos: Bacillus anthrasis causante del Antrax, Clostridium, perfringens, causante de enteritis necrosante y gangrena, Clostridium tetani, causante del tétanos

- Gram negativos - pared celular compleja, con membrana externa y un espacio entre membrana interna y externa -el periplasma- que contiene el saco de mureína y abundantes enzimas. El peptidoglicano es fino, por lo que no retienen el colorante.

Ejemplos: la gonorrea (Neisseria gonorrhoeae), meningitis (Neisseria meningitidis) y síntomas respiratorios (Moraxella catarrhalis)

CONCLUSIONES

- Se observo las siguientes muestras , utilizando tinción simple o tincion de Gramm en donde se observo que cuando una muestra extendida se tiñe con un solo colorante. Si la preparación se tiñe con safranina, las bacterias adquirirían un color rojo, si se utiliza azul de metileno, se teñirán de azul, si por el contrario se tiñen con cristal violeta, las bacterias aparecerán teñidas de color violeta, es decir adquirirán el color del único colorante que se utilizó.

- Se comparo las formas de los diferentes cultivos microbiológicos en donde las bacterias tenían una morfología en forma Cocos, característicos por su forma esférica, mientras que las bacterias coliformes y bacilos teniana una Morfología en forma de Bastones, característicos por su forma alargada en forma de capsula

BIBLIOGRAFÍA

- (06-Nov-2014)

- ALVARADO,