Laboratorio N°3 microscopia

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-Elodea sp: Se depositó unas hojas de Elodea sp en un portaobjeto y se cubrió. Se observó con el objetivo 10x y se posteriormente se dibujó.

-Protozoos: Se tomó un portaobjeto con cuidado de no mancharlo y se le aplicó con un gotario una muestra líquida en el centro de este y se cubrió evitando dejar burbujas de agua. Se limpió el excedente de agua y se observó con el objetivo 40x. Finalmente se dibujó todo.

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Resultados

- Actividad Nº1: Cálculo del aumento y límite de resolución.

-Poder de aumento y apertura numérica de los lentes objetivos.

Aumento (X)

Apertura Numérica (NA)

4X

0.10

10X

0.25

40X

0.65

100X

1.25

-Aumento y apertura numérica de los lentes oculares.

Aumento (X)

Apertura Numérica (NA)

10X

1.8

-Apertura numérica del condensador.

Apertura Numérica (NA)

1.25

- Actividad Nº2: Manejo del Microscopio y Formación de la imagen.

[pic 2]

[pic 3]

- Actividad Nº3: Determinación del Diámetro del Campo Visual.

Fórmula:

[pic 4]

[pic 5]

- DCV obj.4X → 4mm → 4000µm

-Aumento obj.4X → es el mismo para todos los aumentos obj. X

- Aumento obj X →10X, 40X, 100X.

- Aumento obj.10X

[pic 6]

- Aumento obj.40X

[pic 7]

- Aumento obj.100X

[pic 8]

- Actividad Nº4: Observación de Muestras Biológicas permanentes:[pic 9]

[pic 10]

[pic 11][pic 12]

[pic 13]

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Actividad Nº5: Determinación del tamaño celular.[pic 14][pic 15][pic 16][pic 17][pic 18][pic 19][pic 20][pic 21][pic 22][pic 23][pic 24]

Fórmula:

DCV obj.x 40x→ 400µm[pic 26][pic 25]

Nº de células → 48 células.

[pic 27]

[pic 28]

[pic 29][pic 30]

[pic 31]

Actividad Nº6: Observación de preparaciones frescas con y sin tinción.

[pic 32][pic 33]

[pic 34]

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[pic 38][pic 39][pic 40]

[pic 41]

[pic 42][pic 43]

[pic 44]

[pic 45][pic 46]

[pic 47]

[pic 48]

Discusión

Dado a los resultados obtenidos, analizaremos en orden cada experimento respondiendo al cuestionamiento planteado en la guía, dando una explicación lógica y científica.

En la actividad n°2, tras observar la muestra permanente de la letra e se identificó que ésta se encontraba invertida con el lente objetivo 10x. Esto se debe a que el principal causante de este efecto es un prisma de cristal que se encuentra en el interior del microscopio (a la altura de la base del ocular), la función de este prisma es concentrar la luz o imagen aumentada por los objetivos y dirigirla hacia los oculares. Actualmente existen microscopios que tienen un segundo prisma que reinvierte la imagen para corregir esta inversión. (3)

En la actividad n°3, se procedió a determinar el DCV (diámetro del campo visual) para esto se observó un papel milimetrado en el cual cada cuadrado medía 1mm2 se realizaron los ejercicios mediante la fórmula dada en la guía de laboratorio:

[pic 49]

Mediante estos resultados se puede obtener el tamaño de la imagen que se logra ver en el microscopio.

En la actividad n°4, se observaron muestras biológicas permanentes con el objetivo 40x: de Frotis de sangre humana, en el cual se encontró una gran cantidad de eritrocitos con un color rosado dado a la tinción de la giemsa y una ínfima cantidad de leucocitos de un color un poco más oscuro y Corte de Intestino delgado de Rattus norvegicus (Berkenhout) la cual estaba con una tinción de Hematoxilina Eosina se encontró que en algunas partes de la muestra la tinción era más concentrada que otras, la hematoxilina tiñe estructuras acidas (basofilas) en tonos azul y púrpura, y el uso de eosina que tiñe componentes básicos (acidofilos) en tonos de color rosa (4). Se distinguieron los hepatocitos que están en mayor parte del campo y los espacios de Disse.

En la actividad n°5, se determinó el tamaño celular en todos los objetivos (4x, 10x, 40x) utilizando la muestra de Corte de intestino delgado de Rattus norvegicus (Berkenhout)