Microscopia 2

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Previo a la observación de las células sanguíneas se calibro la rejilla del ocular, procedimiento que permitió determinar que la distancia entre dos líneas de la rejilla, en el objetivo de 40X, era de 2,5 micrómetros. Dicha referencia permitió determinar el diámetro de 3 eritrocitos y calcular el promedio de estos, cuyo valor resultó 7,08 micrómetros, ligeramente por debajo de la media encontrada en la literatura de 7,5 micrómetros (7), dicha diferencia puede atribuirse a que solo se tomaron como muestra 3 eritrocitos, de los cuales uno era sobresalientemente pequeño (6,25 micrómetros) en comparación al resto, si se hubiese contado con la medida de más glóbulos rojos el promedio se hubiera acercado más al real. Con respecto a los leucocitos el rango promedio encontrado, en la literatura, corresponde entre 9 a 12 micrómetros (8), el cual concuerda con el encontrado de 10 micrómetros, permitiendo concluir que los leucocitos observados corresponden a Granulocitos Neutrófilos, los leucocitos más abundantes en la sangre (8). Gracias a esta informacion podemos responder la duda planteada por nuestra hipótesis, ya que, si bien los eritrocitos y leucocitos poseen un diámetro similar, los tamaños promedios de estos no coinciden, siendo los eritrocitos más pequeños que los leucocitos.

Actividad C: Determinación del número de eritrocitos en Frotis de sangre

La cámara de conteo es un aparato de vidrio óptico especial de precisión. Se utiliza para contar células u otras partículas en suspensiones bajo el microscopio (9) y está predispuesto al ojo del observador, es decir, si dos personas cuentan la misma muestra lo más probable es que se lleguen a resultados distintos. Utilizando la cámara de neubauer se pudo observar unos pequeños puntos desordenados y estos se encontraban dentro de un plano con líneas, los puntos corresponden a los eritrocitos, y las líneas a los cuadrantes de la cámara, Por otra parte para empezar el conteo se tuvo en cuenta que la grilla central de la cámara mide 1mm x 1mm de área, la cual se subdivide en 25 cuadrados y cada uno de estos cuadrados mide 1/5 mm x 1/5 mm, y el conteo se realizó en 5 cuadrantes (los 4 de las esquinas y el del centro), todos estos previos pasos se realizaron con el fin de obtener un buen conteo de eritrocitos.

Si bien no se logró encontrar el rango exacto de eritrocitos por milímetro cúbico del cordero concluimos que este no debe diferir a la del resto de los mamíferos, ya que tanto el leopardo (10), el ser humano (7) y los ratones de laboratorio (11) poseen el mismo rango, que va desde 4 a 5 millones de eritrocitos por milímetro cúbico. Tras contar los eritrocitos se aplicó la fórmula correspondiente arrojando como resultado 1,6 millones por milímetro cúbico siendo increíblemente bajo, se sugiere que esto se pudo haber producido por aglutinación de eritrocitos en un sector de la muestra, una preparación inadecuada, la muestra es demasiado vieja y no a sido almacenada en las condiciones de temperatura adecuadas, o bien el factor de disolución que poseía la muestra (correspondiente a 1000µl) (12), nosotros preferimos inclinarnos por la última de estas.

Conclusión

Según las investigaciones realizadas en este trabajo, basados en estudios de la muestra fresca y permanente de frotis y observación del cabello, nuestros objetivos planteados al inicio del trabajo se cumplieron y aprendimos: el campo oscuro sirve para visualizar muestras de forma más clara, es posible medir el diámetro de diferentes células y contar la cantidad de células por milímetro cúbico de muestra sanguínea. Se llegó a la conclusión de que nuestra hipótesis se confirma, ya que, si bien los eritrocitos son más pequeños que los leucocitos la diferencia no es considerable y en el momento que los medimos con la reglilla las medidas eran muy similares.

Referencias

1.-Universidad Andrés Bello. Guía Numero 2: Microscopia I, Curso BIO-131 Laboratorio de Biología Celular, 2017.

2.- Michael H. Ross, PhD., Wojciech Pawlina, MD.”Histología” textos y atlas color con biología celular y moléculas.(2013). Panamericana,6a edición. Buenos Aire- Bogotá-Caracas-Madrid-México-Porto Alegre.pp. 383

3.-Universidad Andrés Bello. Guía Numero 2: Microscopia I, Curso BIO-131 Laboratorio de Biología Celular, 2017.

4.- Universidad Andrés Bello. Guía Numero 3: Microscopia II, Curso BIO-131 Laboratorio de Biología Celular, 2017.

5.- Steve Parker, Cuerpo Humano. (2007). DK, 1era Edición, Gran Bretaña .pp 146.

6.- Bruce Alberts, Biología molecular de la célula. (2010). Omega, 6ta Edición, Barcelona. pp. 583.

7.- Herbert Lippert, Anatomía con orientación clínica. (2005). Marbán, 1era Edición, Alemania. Pp 59.

8.- Herbert Lippert, Anatomía con orientación clínica. (2005). Marbán, 1era Edición, Alemania. Pp 62.

9.- https://es.slideshare.net/eliciruela/camara-de-recuento-neubauer

10.- Jiménez Schuhmacher, Alberto. El ratón como modelo animal en oncología: Pasado, presente y futuro. En Boletín Oncológico del área sanitaria de Teruel. Marzo 2007. pp 4.

11.- Claudio R. M. Mauricio, Member, IEEE, Fábio K. Schneider, Member, IEEE, and Leonilda Correia dos Santos.(2010). Image-Based Red Cell Counting for Wild Animals Blood.32nd Annual International Conference of the IEEE EMBS, pp 438.

12.- Bernadette F. Rodak, Jacqueline H. Carr. Atlas de Hematologia Clinica. (2013). Editorial Medica Panamericana, 4ta Edición, España, pp 7.