Reporte 3 bioquimica

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Datos

Distancia recorrida del disolvente: 10.4 cm

Distancia recorrida de los componentes

1-amarillo: 0 cm

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2-amarillo-café: 4.4 cm

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3-verde claro: 7.3 cm

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4-verde bandera: 9.3 cm

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Discusión de resultados

Hoja de espinaca: se cortaron trozos de hoja de espinaca para previamente ocupar un peso de 3 g. Para preparar nuestra muestra se debió haber preparado un medio en este caso el etanol ya que los cloroplastos y otros pigmentos son solubles en él. Cuando la muestra ya estaba en reposo con etanol decimos que esta lista para homogeneizar, el mortero nos ayuda a romper los enlaces celulares y liberar su contenido, la fase líquida la conocemos como suspensión celular por lo que la obtención serán los cloroplastos y algunos otros pigmentos mencionados más adelante. La homogeneización mecánica es importante cuando trabajamos con muestras de pared delgada por lo que el mortero es un instrumento esencial.

Posteriormente aplicamos centrifugación para dos de nuestros tubos que tenía un valor aproximado de 5 ml. Cuando aplicamos dicho método se dice que obtendremos un sobrenadante y una pastilla al fondo.

Como la centrifuga esta dada en revoluciones por minuto y queremos llegar al punto donde se obtengan mitocondrias, cloroplastos, lisosomas; las rpm serán de 2500 por 10 min., y a esto le llamamos sobrenadante. En la pastilla tendremos que quedaran precipitados mitocondrias y micro cuerpos. Es importante mencionar que los factores que afectan a la sedimentación son: la densidad, el peso de cada célula y en ocasiones capilaridad por lo que al centrifugarse ciertas células sedimentaran más que otras. Cuando la centrifugación es finalizada decimos que tenemos una buena muestra porque el sobrenadante se torna en una tonalidad verde fuerte y la pastilla en una tonalidad amarilla-blanca.

Ya obtenido el sobrenadante se llevó a cabo el siguiente método de separación; cromatografía en papel. La cromatografía en papel es un meto que nos ayuda a correr muestras sobre un papel agregando diferentes solventes de acuerdo a su polaridad. Para el componente amarillo obtuvimos que el recorrido es de cero por lo tanto la muestra va hacer menos polar al disolvente usado sin embargo para la muestra 4 de color Verde bandera; la muestra corrió por encima del componente 2 y 3 por lo tanto es lo suficientemente polar para separarse, los componentes extraídos fueron los siguientes:

- Cloroplastos, llevar a cabo la fotosintesis

- Gerontoplastos Los cloroplastos senescentes, amarillos por la presencia de carotenoides, que aparecen en las hojas se llaman gerontoplastos. Son la etapa final, irreversible, del desarrollo.

- Etioplastos e forman a partir de los proplastos en plantas cultivadas en la oscuridad. En ellos, los tilacoides se disponen formando un cuerpo prolamelar, semicristalino. Al ser expuestas las plantas a la luz, los etioplastos se transforman en cloroplastos.

- Cromoplastos Contienen pigmentos como carotina (amarillo o anaranjado), licopina (rojo), xantofila (amarillento).

En la cromatografía de absorción de columna, la separación de mezclas tiene lugar en una columna de un absorbente adecuado introducido a un tubo de vidrio .Se pone la mezcla en la columna y se hace pasar por ella un disolvente apropiado o( una mezcla de disolventes ) siendo las sustancias con los más altos coeficientes de distribución efectivos ,los que se trasladan mas rápidamente hacia abajo en la columna. Por lo tanto la extracción de los pigmentos será más selectiva y la cantidad será mayor.

Conclusiones

Bibliografía