Reporte Practica 3 Hidrolisis de carbohidratos
Enviado por klimbo3445 • 16 de Julio de 2018 • 1.646 Palabras (7 Páginas) • 533 Visitas
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Fundamento teórico
La hidrólisis de una macromolécula puede llevarse a cabo usando diversos procedimientos: empleando ácidos y/o bases fuertes, con catalizadores inorgánicos u orgánicos o mediante enzimas hidrolíticas adecuadas.
La hidrólisis de los polisacáridos puede seguirse midiendo el incremento en azucares reductores mediante el reactivo 3,5-dinitrosalicilato en solución alcalina. El acido 3,5-dinitrosalicilico (de color amarillo) se reduce a acido 3-amino-5 nitrosilicílico, (rojizo oscuro) produciendo una coloración que se mide espectrofotometricamente a 540nm.
La extensión o porcentaje de hidrólisis se determina comparando la cantidad de azúcar reductor presente en cualquier tiempo, con la cantidad de azúcar presente después de la hidrólisis ácida total.
La hidrólisis de los polisacáridos también puede efectuarse por medios químicos. Los ácidos fuertes diluidos catalizan el rompimiento indiscriminado de los enlaces glucosídicos, dando como producto final glucosa.
La estructura polisacarida se demuestra en este experimento, ya que el número de grupos reductores en el medio de reacción aumenta a medida que transcurre la hidrólisis. El progreso de la hidrólisis se mide de la misma forma que en la hidrólisis enzimática.
Metodología
- Hidrólisis enzimática.
- En un vaso de precipitado recoger 2 ml de saliva.
- Cuando este, esté listo para la hidrólisis enzimática, vamos a diluir la saliva original tomando 0.3 ml de saliva y 19.7 ml de buffer pH 6.9
- Inmediatamente usaremos la saliva diluida.
- Si la velocidad de hidrólisis es muy rápida para obtener un crecimiento lineal en los primeros minutos o demasiado lenta, para observar un crecimiento apreciable, vamos a repetir el ensayo usando otra dilución de saliva.
- Rotularemos ocho tubos de ensayo y agregaremos los siguientes reactivos.[pic 2]
- Hidrólisis acida de la celulosa en presencia de ZnCl2
- Colocaremos en una capsula u trozo de algodón desmenuzado.
- Agregaremos 3 ml del reactivo de Lucas y caliente durante tres minutos, agitaremos energéticamente.
- Dejaremos enfriar y neutralizaremos rápidamente con NaOH al 20%.
- Si se forma un precipitado centrifugaremos a 2,500 rpm durante 10 minutos.
- Pasaremos a 0.5 ml de sobrenadante a un tubo, adicionaremos 1 ml de NaOH 2,4N y 1ml del reactivo, 3,5- dinitro salicilato y procederemos en igual forma a la utilizada en las hidrólisis anteriores.
- Repetiremos el procedimiento calentando durante 6 minutos.
Resultados (Del espectrofotómetro).
Valor
Tubo
0
B
0.011
0
0.005
1
0.007
2
0.009
3
0.034
4
0.006
5
0.033
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Cuestionario
1. ¿Cuáles son los productos de la hidrólisis enzimática parcial y total del glucógeno y de la celulosa?
- Los productos finales del glucógeno son la glucosa, maltosa e isomaltosa.
- De la celulosa, sus productos finales son la glucosa y la celobiosa.
2. Explique la diferencia estructural entre la celulosa y el almidón ¿Cómo degradarse enzimáticamente la celulosa?
Celulosa: La celulosa es un hidrato de carbono que forman las paredes de las células vegetales. Es el principal polímero constituyente de las plantas y los árboles. La madera, el papel y el algodón contienen celulosa. La celulosa es una excelente fibra.
El almidón y la celulosa son dos polímeros muy similares, ambos están constituidas por el mismo monómero, la glucosa. Lo único que los diferencia es su estructura.
Almidón: todas las unidades de glucosa repetidas están orientadas en la misma dirección. Pero en la celulosa, cada unidad sucesiva de glucosa esta rotada 180° alrededor del eje de la columna vertebral del polímero, en relación a la última unidad repetida.
En nuestro cuerpo existen enzimas especiales que rompen el almidón en unidades de glucosa, así que nuestro cuerpo puede quemarla para producir energía.
Si estás siguiendo una dieta sana, consigues así la mayor parte de tu energía a partir del almidón. Pero el cuerpo humano no tiene enzimas para destruir la celulosa y así poder obtener la glucosa.
Algunos animales como las termitas, que comen madera, sí son capaces de romper la celulosa.
El almidón es soluble en agua caliente y con él pueden hacerse útiles objetos. La celulosa, por otra parte, es altamente cristalina y prácticamente no se disuelve en nada.
3. ¿Qué son los compuestos llamados dextrinas y cuál es su importancia en la elaboración de alimentos?
Dextrinas. Es un carbohidrato con la misma fórmula que los almidones. Se produce por la hidrólisis del almidón vía temperatura y ácidos. Su naturaleza y comportamiento químico dependen del tipo de almidón del que provienen. Tienen la misma fórmula general que los polisacáridos pero son de una longitud de cadena más corta. La producción industrial es realizada generalmente por la hidrólisis ácida del almidón de patata.
Las dextrinas encuentran uso extenso en la industria, debido a su falta de toxicidad y a su precio bajo. Se utilizan como pegamentos solubles en agua, como agentes de espesamiento en la transformación de los alimentos, y como agentes aglutinantes en productos farmacéuticos.
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