TECNICAS HISTOLOGICAS.

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- La nitidez depende de la longitud de:

- la onda de la luz (la luz de la lámpara),

- de los objetivos y

- del condensador(son lentes que dirigen la luz de la lámpara de forma mas organizada posible hacia la muestra)

Con la técnica histológica vamos a estudiar cómo a partir de muestras vamos a preparar una laminilla o un preparado histológico que va a ser observado al microscopio.

La unión entre el lente ocular y el revolver y los objetivos se llama Cabezal.

Dentro del revolver están los lentes objetivos.

Todos los microscopio poseen un BRAZO a través del cual se deben cargar al momento de trasladarlos de un lugar a otro, y a su vez se coloca una mano DEBAJO del mismo para evitar que se caiga.

Donde van a ir los tejidos se llama Platina (la cual posee un hueco en el centro)

La laminilla se coloca en la Platina de forma que quede dentro del hueco que tiene en el centro para que entre la luz.

Debajo de la platina hay unos tornillos denominados Tornillos para desplazar la Platina (hacia adelante, atrás o a los lados para ubicar la muestra justo debajo del objetivo para poder aumentar la imagen).

Tornillos Macrométrico y Micrométrico, son los encargados de que el objetivo logre la nitidez (se mueven de un lado hacia el otro para enfocar).

Al cambiar el objetivo por otro de mayor aumento siempre se va a perder un poco de nitidez.

Condensador: sistema de lentes que permiten que la luz de la lámpara se acumulen en él para dirigirlos directamente sobre la abertura que está en la platina y enfoque y/o ilumine al tejido y evitar que la luz se disperse.}

Base: es la porción inferior del microscopio.

Las partes del microscopio se pueden dividir en:

- Partes Ópticas: compuesta por todos los lentes (Lente Ocular, Lente Objetivo y el condensador).

- Partes Mecánicas: todo lo demás distinto a los lentes. (Tornillo Micrométrico y Macrométrico, Platina, Brazo, Revolver, Base).

Es importante saber que cuando tomamos muestras de un ser humano que es lo que generalmente hacen los patólogos bucales se llama Biopsia(es la toma de muestras de un tejido en el cuerpo de un ser humano que está VIVO que busca descartar o no que haya una determinada enfermedad o lesión en boca, la cual es procesada para ser convertida en un preparado histológico que va a ser observado en el microscopio óptico de luz clara). Cuando la muestra se toma de un ser humano que está muerto se llama Necropsia.

¿Cómo hacemos para tomar una muestra de esos tejidos y procesarlos?

- Obtension de la muestra a través de la Biopsia. Puede ser Incisional( un

Pedacito de la lesión) o Exisional (toda la lesión).

- El tejido debe fijarse en una sustancia

- Luego esa muestra debe prepararse, deshidratarse y aclararse.

- Luego es incluida en un material que permite cortarla.

- Por último, una vez que está cortada, se entra en la fase de Colorearla o teñirla

porque necesitamos que tomen color

Explicación:

Toma de muestras y la fijación: una vez tomada la muestra se fija principalmente en FORMALDEHÍDO O FORMOL al 10 %; también se usa (aunque es más costoso y más tóxico) el GLUTALALDEHÍDO. Es decir, vamos a colocar la muestra en un frasco principalmente los que se utilizan para recaudar orina porque poseen una rosca que evita que el líquido se salga del envase el cual es transparente y colocamos una cantidad de formol que cubra totalmente a la muestra (este mecanismo se llama FIJACIÓN POR INMERSIÓN, o sea, la muestra es sumergida sobre el fijador) se deja mínimo 24 horas. Existe también la técnica por PERFUSIÓN (se inyecta el fijador en la muestra, es decir, se perfute directamente dentro de ella) el cual se emplea en caso de muestras muy grandes o voluminosas ya que por su tamaño si se hace por inmersión el fijador probablemente no va a llegar al centro de la muestra.

FUNCIÓN DEL MATERIAL FIJADOR:

- fijar para evitar que ocurran los procesos de de degeneración que son típicos de los tejidos muertos. Es decir, cuando un tejido es extraido básicamente MUERE porque se retira de su superficie normal de nutrición.

- entonces evitamos esos procesos normales de putrefacción de los tejidos porque ellos (los fijadores) van a alterar la estructura normal de las células y de los tejidos para preservar cómo se ven al microscopio y evitar la variación de la realidad de ese tejido dentro del cuerpo humano con relación a lo que estamos viendo en el microscopio óptico.

- Ayuda a insolubilizar los componentes de esas células (principalmente las proteínas) a través de la formación de enlaces cruzados para evitar que desaparezcan y mantener la forma de la célula.

- Permite que la muestra alcance una fuerza necesaria para que la muestra pueda ser cortada y procesada. Inhibe las enzimas que son propias que pueden producir la destrucción de ese tejido.

Luego de fijar la muestra, comenzaremos todo el proceso de esta técnica Histológica.

Lo primero es que debemos DESHIDRATAR: colocamos la muestra en un casette y luego de forma manual vamos a colocar la muestra en concentraciones de alcohol, que van a partir desde el 50 % hasta el 100 %. El alcohol saca todo el agua que está dentro de la célula. Se debe deshidratar porque esa muestra tiene que ser ACLARADA (o sea, invadida por el CILENO). Esto quiere decir metemos dentro de los espacios donde estaba el agua el CILENO O CILOL.

Antes esto se hacía manualmente, ahora existen unos aparatos llamados HISTOQUINETE AUTOMÁTICO, en el cual colocas la muestra en un ciclo que generalmente dura 24h.

INCLUSIÓN: una vez que tenemos esa muestra con cileno, necesitamos incluir la muestra en un medio que permita luego cortarla. Es decir, en un medio que sea lo suficientemente rígido y fuerte para mantener la estructura del tejido