LABORATORIO I ENZIMOLOGIA I
Enviado por paola trujillo • 11 de Marzo de 2022 • Documentos de Investigación • 4.214 Palabras (17 Páginas) • 339 Visitas
[pic 1] | Guía de Laboratorio Metabolismo y patología molecular | Código: | Versión: |
Fecha de Emisión: Nov 2021 – marzo 2022 | Título: FACULTAD DE SALUD – DPTO. DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS | ||
Elaborado por: Profesional: Lic. Martha Solórzano | Revisado por: Mildrey Mosquera E | Aprobado por: |
LABORATORIO I
ENZIMOLOGIA I
Para investigar antes de la práctica:
- Escriba un ejemplo de una reacción biológica catalizada por una fosfatasa:
- R// La Fosfatasa ácida puede catalizar la hidrólisis de fosfo monoesteres, liberando como producto la reacción fosfato inorgánico y alcohoL
- Describa en qué tejidos existe una alta actividad de fosfatasa alcalina:
R// L a fosfatasa alcalina tiene concentraciones más elevadas en células óseas y hepáticas. En cambio, está presente en menor proporción en hígado, hueso, riñón e intestino
3.1 Curva de calibración de p-nitrofenol Gráfica profe y nosotras
- Tome 5 tubos de ensayo márquelos con cinta de enmascarar y agréguele a cada uno las siguientes soluciones:
SOLUCION | TUBO (ml) | |||||
Blanco | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
Agua Destilada | 1.5 | 1.47 | 1.44 | 1.41 | 1.35 | |
Buffer pH 9.6 Barbital | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | 1.5 | Muestra Problema |
PNF 2.0 mM | ------ | 0.03 | 0.06 | 0.09 | 0.15 | |
Absorbancia | 0 | 0,429 | 0,820 | 1,241 | 2,066 | 0,960 |
Transmitancia | 100 | 37,3 | 15,1 | 5,74 | 0,86 | 11 |
DATOS DE LA PROFESORA
Absorbancia | 0 | 0,111 | 0,208 | 0,301 | 0,446 | |
Transmitancia | 100 | 77,5 | 61,9 | 50 | 35,8 |
- Efecto de la temperatura
SOLUCION | TUBO (ml) | |||||
Blanco | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |
Agua Destilada | 2.7 | 2.4 | 2.4 | 2.4 | 2.4 | 2.4 |
Buffer pH 9.6 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
PNFP 2.0 mM | ------ | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
Temperatura °C | 25 | 4 | 30 | 37 | 50 | 100 |
Ex. Enzima FAL | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
Absorbancia 405nm | 0 | 0,081 | 0,152 | 0,345 | 0,245 | 0,050 |
- Efecto del pH
SOLUCIÓN | TUBO (ml) | ||||||
Blanco | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | |
Agua Destilada | 2.7 | 2.4 | 2.4 | 2.4 | 2.4 | 2.4 | 2.4 |
Buffer Barbital 0.3 ml | 0.3 | PH 3.4 | pH 8.8 | pH 9.2 | pH 9.6 | PH 10.4 | pH 10.8 |
PNFP 2.0 mM | ------ | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 | 0.3 |
Enzima FAL | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
Absorbancia | 0 | 0,119 | 0,128 | 0,152 | 0,151 | 0,196 | 0,148 |
Para realizar en la casa:
3.1 Gráfica de Absorbancia Vs. Concentración de p-nitrofenol (PNF)
1. Utilizando los datos obtenidos en la práctica dibuje la curva de calibración del PNF:
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