Acidos nucleicos PRACTICA DE LABORATORIO.

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Debido a lo anterior expuesto, el primer contacto práctico será con el material de vidrio, el cuál utilizará permanentemente en el laboratorio de bioquímica, por lo tanto se hace indispensable que el estudiante se familiarice, conozca, domine su uso y cuidado.

MATERIAL DE LABORATORIO

- VASO DE PRECIPITADO Ó BEAKER: es un recipiente de vidrio, cuya capacidad varía entre los 5 y 3.000 ml. Se utiliza para contener, calentar y recoger líquidos, además de efectuar precipitación, titulación, etc.

- CILINDRO GRADUADO Ó PROBETA GRADUADA: es un cilindro de vidrio con una base generalmente hexagonal, que lo mantiene vertical. Los más utilizados son de 10, 25, 50, 100, 250, 500, 1.000 y 2.000 ml de capacidad. Se utiliza para mediciones rápidas de líquidos que no requieran de gran precisión.

- MATRAZ: es un equipo de vidrio redondeados y de base plana. Se utilizan para preparar soluciones, no son recomendables para calentar líquidos. Su capacidad varía entre los 25 y 2.000 ml.

Existen los matraces aforados, que presentan un cuello largo y estrecho que permite realizar lecturas exactas del líquido contenido en él, ya que tienen un aforo (marca en el cuello). Presentan tapa esmerilada. Se usan para preparar y contener cantidad exacta de soluciones, no para medir soluciones.

- ERLENMEYER o FIOLA: recipiente de vidrio con forma cónica. Se utiliza para calentar líquidos, preparar soluciones, titulaciones, etc. Su capacidad varía entre 10 y 1.000 ml.

- BURETA: son tubos de vidrio, graduados en milímetros (décimas, centésimas), las hay también de divisiones menores (micro-buretas). En la parte inferior presentan una llave esmerilada y cónica. Esta llave debe manipularse con la mano izquierda, con la otra mano se sostiene la varilla de vidrio o recipiente para agitar el líquido que se vierte de la bureta. Se utilizan para mediciones exactas de líquido (titulaciones).

- PIPETAS: son tubos de vidrio. Pueden ser aforadas y graduadas. Se utilizan exclusivamente para medir volúmenes de líquidos que van a ser trasvasados.

Las PIPETAS AFORADAS (VOLUMÉTRICAS), pueden tener uno o dos aforos, las que presentan un aforo sirven para medir líquidos desde el aforo hasta la parte inferior y las que tienen dos aforos, miden volumen de líquidos desde el aforo superior hasta el superior.

Las PIPETAS GRADUADAS, tienen divisiones menores entre los extremos, que puede ser en décimas, centésimas y milésimas. Existen dos clases de pipetas graduadas: las que miden volumen desde el 0 (cero) hasta el extremo inferior de la pipeta y las que miden volúmenes desde el cero hasta la última graduación antes del extremo inferior.

Al tomar una pipeta con la mano, nunca se debe tocar el extremo inferior de la misma, esto es una medida de precaución, sobre todo con aquellas pipetas con ácidos ó álcalis, además para evitar contaminación tanto en la solución como en la reacción. Otra precaución que se debe tener con las pipetas, es que estas deben ser colocadas de tal manera que el líquido sobrante no se deslice hasta la parte superior.

Procedimiento para el enrasado de la pipeta: se introduce el extremo inferior de la pipeta dentro del líquido y se aspira por la parte superior, teniendo la precaución de que el extremo inferior este dentro del líquido de lo contrario se corre el riesgo de aspirar aire y líquido, que llegará a la boca del usuario, con el consiguiente peligro. Una vez que el líquido ha sobrepasado el nivel deseado, se retira de la boca e inmediatamente se tapa el extremo (de la pipeta) con la punta del dedo índice, presionando de forma suave y dejando caer, en el mismo recipiente donde se aspiró el líquido la cantidad sobrante hasta llevar el menisco al cero de la pipeta.

- CÁPSULA: recipiente de forma casi semi– esférica, con un pico para verter líquido. Se utiliza para calentar líquidos, evaporar soluciones ya que se puede trabajar directamente sobre el mechero. Pueden ser de acero, porcelana, platino, níquel o cuarzo.

- EMBUDO DE SEPARACIÓN: material de vidrio, en forma de pera, esférica ó cilíndrica. Con llave esmerilada en la parte inferior y tapa esmerilada en la parte superior. Se utilizará para separar líquidos no miscibles entre sí.

- TUBOS DE ENSAYOS: son tubos de vidrio, de diferentes diámetros y largo, son uso múltiples en un laboratorio de química.

- TUBOS PARA CENTRIFUGADORA: son de vidrio o plástico, cónicos ó cilíndricos y resisten altas velocidades en la centrifugadora. Se utiliza para decantar soluciones que contienen sólidos en suspensión.

- TUBOS DE FOLIN – WU: son tubos de vidrio, con un estrechamiento en la parte inferior. Se utilizan para análisis de glucosa en sangre.

- PISETA: envase plástico, con un dispositivo que permite verter líquido.

- MORTEROS: recipiente de porcelana ó vidrio fuerte, que permite la trituración.

Para evitar error de paralaje en las lecturas de cualquier material de vidrio graduado, se debe considerar la tendencia de los líquidos al adherirse a las paredes del recipiente y formar una superficie líquida cóncava ó convexa llamada menisco. Por lo tanto para leer el volumen del líquido, se debe colocar la vista a la misma altura del menisco (ni por encima, ni por debajo del menisco) y determinar la línea de medida tangente a éste, cuando las soluciones son oscuras se toma la línea que coincida con el pico del menisco.

OPERACIONES COMUNES EN UN LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

- CALENTAMIENTO: el calentamiento es una operación que se puede llevar a cabo utilizando diversos medios, los que se emplean mas frecuentemente en el laboratorio son: a llama directa usando gas de petróleo (propano) y a temperatura controlada (baño de María y estufa) usando la electricidad. El primero método se utiliza con sustancias que al calentarlas no son inflamables a la velocidad de la llama.

- PULVERIZACIÓN: procedimiento que consiste en reducir un sólido a partículas muy pequeñas. Existen sustancias que se deben pulverizar para facilitar su solubilidad, puesto que la división de las partículas hace que se aumenten notablemente la superficie que el sólido ofrece al disolvente, y por lo tanto se multiplica la interacción entre el solvente y soluto.

- FILTRACIÓN: consiste en hacer pasar una suspensión de un sólido (o de un gas) a través de un material poroso o filtro, a los efectos de separar las partículas del sólido,