Laboratorio de Biología: Ácidos Nucleicos

Laboratorio 5.

Biomoléculas: Ácidos Nucleicos

I. Extracción e hidrólisis de Nucleoproteínas

• Haga un esquema del proceso de extracción de nucleoproteínas a partir de una muestra de 5g de levadura.

• Investigue el proceso de hidrólisis de nucleoproteínas y describa cómo se realiza el proceso de hidrólisis.

Una hidrólisis ácida remueve todas las bases púricas (hidrólisis de uniones N-glicosídicas entre pentosa y las bases púricas) sin afectar las uniones fosfodiester del esqueleto nucleotídico, por lo tanto obtenemos como producto ácidos nucleicos sin bases púricas.

El proceso de de una hidrólisis ácida de una proteína:

Primero se limpian y se esterilizan los instrumentos. Luego se mezcla una porción de harina de trigo con agua, se amasa y se deja reposar por 10 min. Pasado los 10 minutos se vuelve a amasar debajo del agua, hasta que el agua salga limpia. Para la solución se usa ácido clorhídrico 6 molar en un balón aforado. Se hacen bolitas del glúten obtenido de la masa y se depositan dentro del balón. Después de 16 horas en reflujo. Se recoge la muestra obtenida en un recipiente limpio. Se utiliza un papel cromatográfico para estándares de hidrólisis y marcar las posiciones estándares hidrolizados en el papel y aplicar una o dos gotas de las muestras, secar el papel a temperatura ambiente y colocar en el soporte y colocar en la cuba quedando la línea de lápiz arriba del nivel del solvente que esta en la cuba, cerrar y cuando el solvente cubra la línea y esperar a que se seque el papel y se revela pulverizando con la solución de ninhidrina y asi se identifican los diferentes aminoácidos.

1. ¿Cuál es el uso de la centrífuga en el laboratorio?

Una centrifugadora es un equipo que sirve para la separación de muestras que se quieran analizar en el laboratorio por medio de la fuerza centrífuga para acelerar la decantación de sus componentes o fases (en la mayoría de los casos una sólida y una líquida), según el nivel de densidad que contenga dicha muestra.

II. Identificación de los componentes de las nucleoproteínas.

Responda:

1. ¿Por qué realizamos la prueba de Biuret?

Realizamos la prueba de Biuret para detectar proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos.

2. ¿Qué parte de la nucleoproteína podemos identificar?

Podemos identificar los nucleótidos.

Responda:

1. ¿Por