Cromatografía en capa fina y cromatografía sobre papel

...

Este valor nos da una relación entre las distancias de nuestro solvente. Los valores de la Rx son más reproducibles, debido a que tienen una menor influencia del ambiente respecto a la Rf

Cromatografía en columna:

Una vez obtenido nuestro cromatograma (de silicagel), si lo invertimos los resultados deberían ser los mismos mostrados en el cromatograma.

En la práctica, los resultados no fueron exactos, debido a que se usó una fase estacionaria diferente al silicagel; se usó como fase estacionaria la alúmina. La alúmina posee una mayor fuerza de atracción con el anaranjado de metilo, mientras que esa misma fuerza disminuye con el azul de metileno. Por esa razón, al momento de echar el etanol, fácilmente puede diluir el azul de metileno de la mezcla. Mientras que con el anaranjado de metilo de demorará más tiempo para diluirlo de la mezcla.

El proceso de separación puede tardar varios minutos, para el azul de metileno puede tardar segundos, pero para el anaranjado de metilo podría tardar varios minutos. Para acelerar la separación del anaranjado de metileno de la muestra, se comenzó a verter una mayor cantidad del disolvente, es decir el etanol. Sin embargo esta acción trae sus consecuencias, el color del anaranjado de metilo comienza a cambiar a un color rojo. Esto se puede tener varios factores, entre ellos está el cambio de pH del anaranjado de metilo. Esto explica el cambio de color.

V. Conclusiones:

Cromatografía en capa fina y cromatografía sobre papel

Después de realizar estos dos experimentos podemos concluir que la relación de frente del anaranjado de metilo es mayor que la relación de frente del azul de metileno porque este recorre una mayor distancia en ambos casos además de que la cromatografía en capa fina es más eficiente que la cromatografía sobre papel filtro, aun así ambos son adecuados para determinar los compuestos de una mezcla

Cromatografía en columna:

De esta experiencia se puede concluir que el colorante azul de metileno se desplaza más rápidamente que el anaranjado de metileno cuando se le agrega el etanol y la alúmina por lo que es adecuado si es que se quiere separar los compuestos de una mezcla.

VI. Anexos:

Cromatografía en capa fina y cromatografía sobre papel:

1.- ¿Qué entiende por Rx?

- Una reacción es un proceso en cual una o varias sustancias cambian su composición química, intercambiando átomos y electrones.

2.- ¿Cuáles son las diferencias entre la c.c.f. y la de papel?

- En la c.c.f se usa un cromatofolio (lamilla de silicagel revestido de aluminio) y el la cromatografía en papel se usa papel filtro (fibra de celulosa).

- Según el material utilizado en la preparación de la capa fina, el mecanismo puede de la separación puede ser la adsorción, el reparte, el intercambio iónico o una combinación de estos; mientras en la cromatografía sobre papel es una cromatografía de partición.

3.- Cite algunas aplicaciones de la cromatografía en su especialidad

- Aplicación en compuestos biológicos: Se usa para separar biomoleculas como proteínas o ácidos nucleicos y determinar su peso molecular

4.- Interprete los valores de Rf 0,05; 0,6 y 0,98

- Rf = 0,05: La distancia recorrida por la sustancia es la veinteava parte de la recorrida por el solvente.

- Rf = 0,6: La distancia recorrida por la sustancia es 3/5 de la recorrida por el solvente.

- Rf = 0,98: La distancia recorrida por la sustancia es proporcional a 49, mientras que la recorrida por el solvente es a 50

5.- Introduciría algún cambio cuando se tiene un Rf de 0,05, ¿Por qué?

- No se introduciría ningún cambio, ya que la distancia entre sustancia y solvente es amplio y se podría identificar la sustancia sin problema.

6.- Explique algún método para localizar las bandas de adsorción cuando se trabaja con sustancias incoloras en una columna.

- Método físico: Se aprovecha de ciertas propiedades físicas, como la fluorescencia, emisión de radiación visible al absorber rayos ultravioleta o UV, y la radiactividad. Son pocas las sustancias que pueden revelarse usando estos métodos).

7.- ¿Qué es la “electroforesis” y cuál es su principal aplicación en los compuestos biológicos?

- Es una técnica de separación que implica el transporte de especies cargadas a través de una disolución, los aniones van al cátodo y los cationes van al ánodo, por la influencia de un campo eléctrico.

Cromatografía en columna:

1.- ¿Cuál es la principal utilidad de la cromatografía en columna?

- Es útil para la separación de mezclas.

2.- ¿Qué fenómenos físicos intervienen en una columna cromatografía que utilice silicagel como fase fija?

- Adsorción, desorción, dilución y solubilidad

3.- ¿Cuáles son las principales diferencias entre un HPCL y una columna cromatográfica simple?

- En la columna de HPCL se pueden usar diversos tipos de relleno de columna.

- En la columna de HPLC el solvente o fase móvil circula con mayor dificultas. Por ello el solvente debe ser impulsado a alta presión.

- Las columnas de HPCL suelen estar construidas en materiales muy fuertes como el acero inoxidable.

- Los solventes de HPCL deben tener un mayor grado de pureza.

- En la columna de HPCL, el eluato, al salir de la columna, pasa a través de un detector para controlar la presencia de los compuestos eluidos.

4.- ¿Cuál es el principal factor que hace que la HPCL sea mucho más eficiente que una columna cromatográfica simple?

- El hecho de que en la