El Metodo de bacteria sulfato reductoras

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- DESCRIPCION DE LA TECNICA DE DILUCIONES DECIMALES.

- Etiquetar los frascos con número consecutivo, dilución (1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000,…) fecha y procedencia.

- Limpiar con algodón impregnado de alcohol los tapones de hule de cada uno de los viales de cultivo.

- Usando una jeringa estéril, tomar 1 ml de muestra eliminándole el aire, inyectarlo al primer vial de cultivo, y homogeneizar mediante agitación vigorosa, sin retirar la jeringa del tapón (primera dilución o 1/10)

- Con la misma jeringa, tomar 1 ml del primer vial e inyectarlo en el segundo, homogeneizar igual que en el punto anterior (segunda dilución ó 1/100)

- Con la misma jeringa, tomar 1 ml del segundo vial e inyectarlo en el tercero, homogeneizar igual que el punto anterior (tercera dilución ó1/1000)

- Repetir el proceso anterior cuantas veces se considere necesario, para obtener la cuarta, quinta, sexta, dilución, etc.

- Incubar los viales por un período de 4 semanas, a la temperatura que tenía la muestra al momento de tomarla, ó en su defecto de 30 - 35ºC.

- La Cantidad de diluciones decimales que se pueden realizar, dependen del criterio y experiencia del analista y la contaminación del sistema.

[pic 3]

Esquema N°1 – Preparación de diluciones decimales.

- CUANTIFICACION DE BACTERIAS SULFATO REDUCTORAS (BSR)

- Después de incubar examinar para ver si hubo crecimiento bacteriano.

- Es posible obtener resultados en un menor tiempo, cuando no se observa cambio alguno, después de varios días de haber sido incubados y de que algunos viales hayan mostrado presencia de Bacterias.

- El crecimiento de Bacterias Sulfato - Reductoras, se demuestra por la aparición de un precipitado negro en el vial inoculado, al compararlo contra la turbidez de uno sin inocular.

- La cantidad de las Bacterias Sulfato - Reductoras se determina con la máxima dilución, en la que presente el crecimiento según el esquema N°2.

- La información relativa a la técnica de monitoreo mediante análisis microbiológico, debe ser registrada en el formato No. IPN-CIDIM-MDVA-EICCI / FMB-003

Positivo a las concentraciones:

Bacterias/ml de solución

10 -1

10 -2

10 -3

10 -4

10 -5

[pic 4]

0 – 9

10 - 99

100 - 999

1,000 – 9,999

10,000 – 99,999

10 -1

10 -2

10 -3

10 -4

10 -5

Esquema N°2 – Cuenta Bacteriana.

Nota: Utilizando los viales para detección de BSR, suelen haber algunos problemas en la interpretación de los resultados, sobre todo cuando la muestra original presenta algún contenido de sulfuros, dando una interpretación falsa positiva. Para este caso, en el momento de la inoculación, de inmediato se observa la formación de un precipitado negro, precipitado que no se debe considerar, en el conteo de Bacterias Sulfato - Reductoras. Si sucede este problema, es aconsejable dejar reposar el vial hasta que el precipitado se asiente. Una vez sucedido esto, se procede a tomar una muestra de 1 ml, la que se inyecta en un segundo vial, para continuar con el procedimiento habitual de preparación de diluciones.

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- REGISTRO DE CONTROL DE CAMBIOS.

DESCRIPCIÓN

REVISIÓN

FECHA

Sin Cambios

0

Mayo / 2011