En este experimento, estarás revelando los códigos de barras genéticos de varios individuos y un culpable.

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El tipo de ADN del sospechoso A para el locus TH01 es (5-3) El tipo de ADN del sospechoso B para el locus TH01 es (6-10)

¿Cómo se detectan los alelos STR?

La clave para el perfilamiento del ADN es la amplificación de las copias presentes en las pequeñas cantidades de ADN probatorio por reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Usando cebadores específicos de las secuencias de ADN a cada lado de la [TCAT] STR, miles de millones de copias de cada uno de los dos alelos originales TH01 en el tipo de ADN de una persona se sintetizan en la reacción. Estas copias contienen el mismo número de STR presentes en las copias de ADN originales y se pueden visualizar usando electroforesis en gel de agarosa. En comparación con un patrón de tamaño de ADN, o escala de alelos, que corresponde a los tamaños conocidos de los alelos TH01, se pueden determinar y comparar los tamaños exactos de los productos de PCR de los ADN de la muestra.

En la figura 10 se muestra un diagrama de los resultados para la tipificación de TH01 del sospechoso A y del sospechoso B. En este ejemplo de dibujos animados, se ha realizado PCR en ADN de 2 sospechosos usando cebadores específicos para el locus TH01. Después de la electroforesis en gel que separa los productos de PCR según su tamaño, se compara el patrón de bandas con la escala de alelos para identificar los alelos presentes en las muestras.

Imagínese un escenario en el que el sospechoso A y el sospechoso B son acusados ​​de estar involucrados en un triángulo amoroso y de cometer el asesinato de una tercera persona en el Motel Highway; La persona que realmente disparó el disparador es desconocida (para más información sobre este escenario, vea la página siguiente). Además de las muestras de ADN de la escena del crimen, el especialista forense aislará el ADN de los sospechosos, las víctimas y cualquier otro presente al genotipo como controles. Utilizando el análisis basado en PCR, las muestras serán examinadas en 13 ubicaciones genéticas diferentes, o loci, utilizando software para interpretar los resultados de los productos de amplificación. En el análisis de la escena del crimen real, el perfil de ADN se realiza en muchos loci para mejorar el poder de la discriminación de las pruebas. En términos simples, el poder de la discriminación es la capacidad del perfil de distinguir la diferencia genética entre individuos diferentes. Cuanto mayor sea el número de loci perfilados, más poderosa será la capacidad de discriminar.

Imagine el siguiente escenario:

Escena: The Highway Motel, # 1 Dark Highway, en ninguna parte Configuración: Habitación # 13.

El gerente del motel oye voces fuertes, una mujer grita, y un tiro suena. El gerente corre a la ventana a tiempo para ver las luces de un coche que se aleja a toda prisa. La puerta de la habitación # 13 está abierta. El gerente corre a la puerta abierta, para ver a un hombre acostado boca abajo en un charco de sangre. Llama al 911. La policía llega y comienza a examinar la escena del crimen. Un aparente homicidio, pero sin pistas obvias sobre quién cometió el crimen.

O…?

Se llama a un especialista forense para examinar la escena del crimen y recopilar pruebas. A pesar de que parece que las personas involucradas no dejaron evidencia, el especialista puede usar pruebas de laboratorio que pueden decir quién estaba en la escena del crimen de una sola gota de sangre o un pelo solitario. ¿Es esto una historia de ciencia ficción, o realidad?

Mucho una realidad. Las pruebas se realizan rutinariamente en laboratorios de pruebas forenses en los Estados Unidos y en muchas otras partes del mundo a partir de una sola célula, ya veces de muestras que tienen décadas de antigüedad. La razón de esto es posible es debido al ADN. Para poder realizar pruebas de laboratorio, el especialista necesita material biológico para trabajar. A menudo, hay muy poco material en la escena de un crimen, y no en cantidades que permitan el análisis. Para evitar este problema, el especialista se aprovecha de un proceso que cada célula de su cuerpo utiliza para dividir.

La parte más importante de la vida de cualquier célula es cuando se compromete a reproducirse y dividirse. El resultado básico de cualquier división celular es la creación de dos células hijas idénticas de una célula original. Para asegurar que esto suceda, la replicación del ADN debe tener un alto grado de especificidad y precisión, es decir, debe copiar exactamente el ADN. Para ello, las enzimas implicadas en la replicación del ADN utilizan la información ya contenida en las hebras existentes para hacer nuevas copias de ADN. Esta idea básica - la copia exacta del ADN de una plantilla - es la base para una nueva tecnología que ha revolucionado muchas áreas de la ciencia, la medicina y los tribunales.

La PCR permite al especialista forense amplificar o copiar específicamente cualquier región del ADN que le interesa. La PCR es la base para la prueba de ADN que se utiliza actualmente en casi todos los análisis forenses.

En este experimento, se realizará un análisis de PCR en un solo locus, el locus BXP007, usando ADN de molde obtenido de una escena de crimen simulada y una víctima. Después de la PCR, se ejecutará un gel de agarosa para separar los productos de PCR, visualizar los productos de PCR, compararlos con una escalera simulada de posibles alelos para este locus, y asignar un genotipo para las plantillas. A continuación, verá si alguno de los sospechosos "genotipo coinciden con la escena del crimen, y ver si se puede determinar la historia policiaca. Vamos a examinar la evidencia de ADN y averiguar quién disparó el gatillo.

En esta parte del experimento, obtendrá muestras de ADN que se han recogido de una escena del crimen y cuatro individuos sospechosos de estar involucrados en el crimen. Su tarea es amplificar la región de interés (el locus BXP007, un alelo polimórfico) de las muestras de ADN. Una vez completado, analizará sus productos de PCR usando electroforesis en gel para determinar los genotipos de las muestras en el locus BXP007 y coincide con el ADN del escenario del crimen con uno de los sospechosos.

1. Tendrá 6 tubos en hielo y 5 tubos de PCR de 0,2 ml en un bastidor en su estación de trabajo.

En el hielo, usted debe tener -

Un tubo amarillo marcado con MMP que contenía líquido azul.

5 tubos marcados CS (tubo