GRAVIMETRIA y volumetria.

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16. En el laboratorio se utilizaran batas, uniformes u otras prendas apropiadas; no se llevará ropa de laboratorio fuera de este; se desinfectaran las prendas contaminadas por procedimientos apropiados.

17. Siempre que sea necesario proteger los ojos y la cara de salpicaduras o impactos se utilizaran gafas de seguridad, viseras o pantallas faciales u otros dispositivos de protección.

18.Sólo se autorizará el paso a la zona de Trabajo del laboratorio a las personas que hayan sido informadas sobre los posibles riesgos y cumplan las normas de bioseguridad.

19. No se permitirá la entrada de niños en las zonas de trabajo del laboratorio.

20. Debe existir un programa de control de plagas.

21. Debe existir un programa de aseo y desinfección

22. Debe existir un programa de Aseguramiento metrológico de equipos e instrumentos de medición.

23. No se permitirá la entrada en el laboratorio de animales.

24. Evitar al máximo transitar por el laboratorio

25. Trapear el piso del laboratorio con un detergente, no barrer en seco, para evitar dispersar en el ambiente los microorganismos sedimentados.

26. Habrá que utilizar guantes en todos los trabajos que entrañen un contacto accidental directo con sangre, material infeccioso o animales infectados. Los guantes se deben quitar asépticamente y esterilizar en autoclave con otros desechos de laboratorio antes de proceder a su eliminación.

27. Todos los derramamientos, accidentales y exposiciones actuales o potenciales a material infeccioso se notificaran inmediatamente al coordinador del laboratorio.

28. Habrá que llevar un protocolo escrito de estos episodios y prever una evaluación, vigilancia y un tratamiento médico apropiado.

29. Deben existir procedimientos documentados para todos los procesos que se realizan dentro del laboratorio.

30. Se deben diligenciar los registros correspondientes al control operacional de los equipos.

31. Es necesario tener conocimientos sobre primeros auxilios, Fichas MSDS de las sustancias químicas que se encuentran dentro del laboratorio y un almacenamiento adecuado de los reactivos documentado en la matriz de compatibilidad de los mismos.

- Toma de muestras de Agua

Se trabajará por grupos de trabajo de cuatro personas, la muestra de agua será tomada de acuerdo a la zona donde el grupo elija, para lo cual deberán seguir las siguientes recomendaciones:

- El material para la toma de muestra, debe estar estéril. Para realizar esto deben acercarse con un envase de vidrio al laboratorio y pedirle a la laboratorista que les esterilice el material, durante los días jueves y viernes 03 y 04 de Septiembre.

- Para la toma de muestra, remítase a lo establecido en el protocolo del Instituto Nacional de Salud dependiendo de la muestra que vaya a tomas así será el procedimiento.

- Una vez tomada la muestra, no puede superar las 48 horas para su respectivo análisis en laboratorio y la muestra debe estar refrigerada.

Análisis en laboratorio:

Se debe separar los microorganismos de la población mixta en la que se encuentra. Para esto se empleará la técnica de filtración por membrana.

Rotular todo el material indicando dilución, o técnica de siembra, medios de cultivo

1. En condiciones de asepsia, montar el matraz, soporte, embudo, pinzas y conectarlo al sistema de vacío.

2. Con las pinzas, previamente flameadas con alcohol y enfriadas, colocar la membrana en el soporte, montar nuevamente el embudo y fijarlo con la pinza adaptadora.

3. Mantener el vacío cerrado.

4. Agitar suavemente el frasco que contiene la muestra de agua y verter un volumen conocido de ella en el embudo del equipo Millipore.

5. Abrir la llave del vacío.

6. Filtrar; cuando haya pasado toda la muestra, lavar el embudo con la solución salina estéril (100 mL).

7. Cerrar el vacío antes de retirar la membrana.

8. Retirar la membrana tomándola con las pinzas Millipore, previamente flameadas con alcohol y enfriadas. Depositarla asépticamente la membrana sobre la caja de petri de ABRV, asegurando el contacto de la membrana con el medio y sin dejar burbujas de aire. Tapar la placa de petri, verificar la identificación de la placa con el número de la muestra y fecha de siembra. Colocarla en forma invertida; es decir, con la tapa hacia abajo

9. Incubar a 37° C durante 24-48 h.

10. Al término de la incubación: Revisar las membranas sobre las placas y ubicar la presencia de colonias de bacterias coliformes.

11. Realizar el conteo de colonias características y calcular el número de UFC /100 mL de muestra.

12. Consultar la Normatividad Colombiana, que señala los límites permitidos de bacterias coliformes fecales y confirmar si el agua analizada reúne y cumple con lo establecido.

Se realizará el conteo de las Colonias formadas y se llevarán a cultivos axénicos para realizar tinción Gram en el caso de las bacterias.

Identificación de Microorganismos

Para la Identificación de los Microorganismos, se tendrán en cuenta características Macroscópicas y Microscópicas.

Características macroscópicas:

A partir de cada cultivo inicial, se identificará: Color (Colonia, medio), Tamaño, forma, borde, superficie, levantamiento, consistencia, transparencia.

Se deben analizar las características macroscópicas de estas colonias antes de realizar la tinción y montaje al microscopio.

Características Microscópicas:

Bacterias: Se tomará un inoculo de la colonia bacteriana escogida mediante un asa en aro, se aplicara