Informe bases biologicas y bioquimicas laboratorio de membrana

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- Procedimientos de Diálisis

Experimento N°3:

- En un vaso precipitado se mezcló 2ml de solución de albúmina 2,5%, 2 ml de NaCl al 4% y Glucosa al 2%.

- Seguidamente se preparó una bolsa construida con una membrana artificial, a la que se le amarró firmemente hilo de cocer en un extremo, para verter en la bolsa la mezcla preparada y cerrar el extremo abierto.

[pic 2]

- Posteriormente se suspendió esta bolsa con la mezcla en un soporte universal y sumergió en un vaso precipitado que contenía agua destilada.

- Se dejó la bolsa sumergida durante 20 minutos. Luego se retiró la bolsa y tomamos 3 alícuotas de 5 ml del agua contenida en el vaso precipitado para colocarlas en tubos de ensayo separados y rotulados.

- En una alícuota se verificó la presencia de Cloruro y en la otra se verificó la presencia de Albúmina y en una tercer se verificó la presencia de Glucosa.

- Para comprobar la presencia de Cloruro se añadió Nitrato de Plata a la solución. Para la presencia de Sodio, se tuvo que quemar el Asa de Nicromo para que este arrojara una pequeña llama mientras se quemaba.

- Para comprobar la presencia de proteínas se añadió reactivo de Biuret para ver si la muestra se teñía o no de violeta indicando presencia.

- Con el reactivo de Benedict se comprueba la presencia de Glucosa al calentar la muestra y arrojar una coloración naranja.

- Procedimiento Osmosis.

Experimento N°4: en 3 tubos de ensayo marcados se añadió lo siguiente:

- Tubo 1: colocar 3 ml de solución de NaCl 0,2%.

- Tubo 2: colocar 3 ml de solución de NaCl 0,9%.

- Tubo 3: colocar 3 ml de solución de NaCl 5%.

Continuamente, procedimos a agregar 5 gotas de sangre a cada uno de los tubos numerados. Mezclamos el contenido de los tubos y describimos las observaciones macroscópicas de cada uno de ellos, e indicamos en que tubo hay hemolisis.

Experimento Nº5:

- Se realizó una preparación microscópica del contenido de cada tubo, para luego observarlos en el microscopio con objetivo de aumento mayor, y asì dibujar y anotar resultados respecto a las células que han sufrido cambios estructurales tales como, hemolisis, crenación, entre otras.

- Se realizó la preparación de tres catafilos de cebolla, para luego agregar solución de NaCl al 5%, NaCl 0,2% y NaCl al 0,9%. Luego de esto, se procedió a observar, dibujar y anotar los resultados obtenidos.

Resultados.

- Procedimiento de Difusión.

Experimento Nº 1: Los siguientes resultados fueron medidos a través de la observación con el fin de comparar la velocidad de difusión en los casos correspondientes luego de agregarle a cada tubo de ensayo 2 gotas de azul de metileno.

Tabla de velocidad de difusión 1

Tubo de ensayo

Velocidad de difusión (según observación)

1 Agua destilada

Gran velocidad de la difusión

2 Sacarosa 2,5 %

Difusión moderada

3 Sacarosa 20 %

Difusión moderada pero más lenta que la sacarosa al 2,5%

4 Albúmina 2,5 %

Velocidad de difusión muy lenta

En el agua destilada es donde existió una difusión a mayor velocidad, la cual se fue haciendo más lenta a medida que cambiábamos la sustancia y su concentración. Podemos concluir gracias a las soluciones de sacarosa al 2,5% y 20% que la difusión puede verse alterada gracias a la concentración de la sustancia (aunque sea la misma). Sumado a esto, podemos observar que la solución de albúmina al 2,5% fue quien presenta mayor resistencia a la difusión del azul de metileno.

Experimento Nº 2: En la siguiente tabla se comparan los resultados obtenidos mediante la observación de la velocidad de difusión de las siguientes muestras luego de agregar 1 gota de azul de metileno a cada una:

Tabla de velocidad de difusión 2

Tubo de ensayo

Velocidad de difusión (según observación)

1 Glicerol

Presenta una difusión lenta, en donde se pueden ver dos fases, quedando el azul de metileno en el borde superior.

2 Aceite comestible

Presenta una difusión lenta, el azul de metileno se puede observar en la zona inferior del tubo de ensayo luego de un periodo de 10 minutos aproximados.

3 Sacarosa 2,5%

Difusión moderada, luego del paso de 10 minutos aproximados el azul de metileno cubre toda la muestra de dicho color.

4 Agua

Al contacto con azul de metileno, difunde rápidamente

En este experimento se observar diferencias en cuando a la velocidad de difusión lo cual se explica ya que se trata de moléculas químicas distintas, en donde sus características propias definirán si actuarán facilitando o impidiendo la difusión del azul de metileno a través de la sustancia.

- Procedimiento de Diálisis

Experimento Nº 3: Los resultados de este experimento fueron obtenidos luego de realizar el procedimiento correspondiente y previo, en donde se preparó la membrana de diálisis y se sumergió en agua destilada durante 20 minutos.

Los resultados serán divididos en dos segmentos, uno para analizar el medio extracelular de la muestra y otro para analizar el medio intracelular de la misma. Para ello se extraen 4 muestras de cada tipo (extracelular e intracelular) las que son depositadas en tubos de ensayo para su análisis. El análisis para observar la presencia de sodio se realiza empleando un tubo de platino, el que se sumerge