LABORATORIO TRABAJO PRÁCTICO N° 4 Extracción simple del ADN

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Luego de centrifugar, se extrajo el sobrenadante de la muestra el cual

quedó transparente y se dividió en 5 tubos de ensayo con 3 mL de muestra aproximadamente.

Los 5 tubos recibieron alcohol en diferentes porcentajes, cada uno permitiendo una visibilidad diferente del ADN, siendo claramente la más débil la de 60% y la más notoria, la de 95%.

En el tubo con alcohol al 95% se aprecia mejor una capa viscosa en la interfase de ambos líquidos.

Al utilizar mayor concentración de alcohol permite que el ADN precipite con mayor facilidad hacia la interfase de los líquidos.[pic 6]

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Hecho que se destacó aún más al aplicarles frio por 5 minutos.

¿Cómo podría demostrar la presencia de ADN en el precipitado blanquecino?

- Discusión: (1/4 de la nota)

En el principio de el experimento fue necesario triturar las frutas para homogeneizar las muestras y facilitar así la separación del ADN de proteínas y otros compuestos. Seguido de eso agregamos la sal de mesa la cual fue utilizada para que las hebras de ADN se unieran y precipiten de la solución a continuación se añadió lava lozas para romper las uniones membrana por disolución de lípidos y proteínas de las células realizado esto se utilizo una centrifuga. Fue necesario utilizar una centrifuga ya que éste método en particular nos permite separar por la fuerza centrífuga sólidos suspendidos en un medio liquido por sedimentación o para separar líquidos de diversa densidad. Los movimientos rotacionales permiten generar fuerzas mucho más grandes que la gravedad en periodos controlados de tiempo. (1) Posteriormente se le incorporó alcohol a las distintas muestras. En este proceso el alcohol hace que el ADN pierda contacto con las moléculas de agua que lo rodean y lo aísla de la solución acuosa. Gracias al alcohol se pudo observar el ADN, que en sí no fue una cantidad considerable puesto que es posible que se empleó demasiado tiempo en moler la frutilla por lo que el ADN comienza a degradarse (2). La utilización de alcohol en distintas concentraciones fue para denotar la función de esta sustancia en el experimento, ya que las menores concentraciones precipitaron una baja cantidad de ADN y las muestras con mayor concentración nos posibilitaron observar una mayor cantidad, podemos señalar que el alcohol en mayor concentración hizo que una mayor cantidad de moléculas de ADN se separara de otros componentes presentes en la mezcla.

La mayor cantidad de ADN extraído provino de la banana referente a que esta fruta en composición nutricional posee proteínas en mayor cantidad, las cuales están formadas de aminoácidos y como bien sabemos el ácido desoxirribonucleico o ADN esta formado también por una secuencia de nucleótidos los que están formados de aminoácidos.

En las muestras finales con alcohol se observó que en las de banana se extrae más ADN que en las de frutilla, en ambas muestras al 95% de alcohol se observa claramente el ADN (liquido blanquesino) precipitado en la interfase de los líquidos, esto ocurre ya que con el alcohol al ser una sustancia polar menos densa hace que suba una sustancia polar más densa en este caso el ADN ya que las demás sustancias son aisladas por este mismo.

¿Por qué es necesario incubar en hielo en la etapa final? ¿Qué factores determinan ese resultado? ¿ Que resultado habría obtenido si fuera pisco frio en lugar de las soluciones de etanol con que trabajo?

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- Conclusión:

La realización de este laboratorio cumplió bastamente nuestros objetivos, nos demostró que es posible extraer ADN de alimentos cotidianos, y lograr visualizarlo espacialmente, mediante una serie de procesos que lo separa de componentes celulares que lo rodean utilizando implementos simples y otros más complejos como una centrifuga.

También se aprendió el funcionamiento de una centrifuga siendo necesaria una calibración de dos muestras de igual masa para que ésta pudiera llevar a cabo el proceso de separación.

Una particularidad ocurrida en el experimento fue que la muestra de banana nos permitió apreciar el ADN en mayor cantidad en relación a la frutilla, concluyendo en una base nutricional y biológica que esto se debió a la mayor cantidad de proteínas que la banana posee frente a la frutilla.

- Bibliografías y referencias:

www.conacyt.gob.mx Imagen 1.

(consultado: 20.04.2016)

www.instrumentosdelaboratorio.net (1)

(consultado: 20.04.2016)

www.microbial-systems.com (2)

(consultado: 20.04.2016)

www.es.wikipedia.org

(consultado: 17.04.2016)

www.lageneticadethomas.blogspot.cl

(consultado: 17.04.2016)

www.ehowenespanol.com

(consultado: 17.04.2016)

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