La tinción de Gram es denominada de tipo diferencial, ¿Cuál es el fundamento?

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Sabemos que el peptidoglicano está presente en las Gram Positivas y Negativas, pero la cantidad es diferente, este es un factor por el cuál la coloración se vera definida.

La diferenciación se hace añadiendo pequeñas cantidades de etanol a las células teñidas con cristal violeta. El citoplasma de las células que han perdido el cristal violeta se tiñen con otro colorante (safranina). La diferencia de color se relaciona con el tipo de pared bacteriano: células de color violeta (bacterias de pared Gram positivas) y células de color rosa (bacterias de pared Gram negativa).

En realidad la diferencia de color no es específica de la pared bacteriana: todas las células sin pared (como las animales) pierden fácilmente el cristal violeta (se verán de color rosa). Todas las células con pared gruesa (como las de hongos) se verán de color violeta. La correlación entre el color y el tipo de pared solo tiene sentido con células bacterianas (salvo excepciones).

El cristal violeta es básico (se une a componentes celulares de carga negativa). Atraviesa la envuelta celular y se acumula en el citoplasma. Para facilitar la diferenciación se mezcla lugol con cristal violeta: el complejo cristal-violeta-lugol precipita. Así el lugol dificulta la salida del cristal violeta de ambos tipos de células, pero es más fácil de extraerlo de las Gram negativas que de las Gram positivas.

5.- Hacer un glosario con los siguientes términos:

- Colorante primario: Es un tipo de colorante utilizado en las tinciones, su función es impartir color a todas las células. Con el objetivo de establecer un contraste de color, el segundo reactivo usado es un agente decolorante, el cual puede decolorar la célula completa o solo parte de ella.

- Colorante de contraste: Es el que le da a las células decoloradas un color que contrasta con el del colorante primario. El colorante de contraste no puede ser absorbido por células que no han perdido el colorante primario. De esta manera, tipos de células o sus estructuras se pueden distinguir unas de otras en función del colorante que es absorbido.

- Mordente: Mordiente es cualquier sustancia que forme compuestos insolubles con colorantes y determine su fijación a las bacterias. Intensifican la tinción porque aumentan la afinidad de la célula por el colorante

- Decolorante: Sustancia que tiene como función retirar el colornte de la célula.

Fuentes: www.microbiologybook.org/Spanish/chapter1.htm