PROTOCOLO DE VALIDACIÓN

...

- Leer las diez muestras placebo preparadas en el ítem 5.2.1 en el espectrofotómetro, realizando un barrido entre 200 nm – 400 nm, utilizando agua como blanco.

- Porcentaje de recuperación

- Pesar exactamente 20.0 mg de metoclopramida (Estándar de trabajo) realizando la corrección de pureza y humedad, llevar a balón volumétrico de 200.0 ml, llevar al ultrasonido por 5 minutos y completar volumen con agua destilada para obtener una concentración de 100 ppm.

- Tomar 0.1ml de la solución de 100ppm, distribuir dicho volumen en un espacio de 25cm2, luego frotar la superficie con papel de filtro de fibra de vidrio (2.5cm *2.5cm) en una sola dirección, depositar el papel de filtro en un tubo de ensayo y adicional 10.0ml de agua destilada para obtener una concentración de 1ppm, agitar y filtrar utilizando una membrana de 0.45 µm. leer en el espectrofotómetro a la longitud de onda de máxima absorbancia del activo, utilizando agua destilada como blanco.

- MÉTODOS ESTADÍSTICOS

- Suma de cuadrados: Determinar la ecuación de la recta.

- Gráficos, curvas de Calibración.

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ANÁLISIS DE RESULTADOS

- Linealidad

Tabla N° 2 Resultados de la linealidad

Concentración en partes por millón

0.5 ppm

1.0 ppm

1.5 ppm

2.0 ppm

1.3744-03

3.5324E-02

5.2167E-02

7.7433E-02

1.4060E-03

3.2814E-02

5.1979E-02

7.8259E-02

1.4289E-03

3.2750E-02

5.1920E-02

7.9053E-02

- Especificidad placebo: La técnica analítica demostró que la absorbancia promedio de los excipientes obtenida a la longitud de onda de máxima absorbancia utilizada para calcular el límite de detección del principio activo, no es mayor que dicho límite.

Tabla N° 3 Resultados de la especificidad

Muestra Placebo N°

Absorbancia

Muestra Placebo N°

Absorbancia

1

2.5229E-03

6

2.6307E-03

2

2.6412E-03

7

2.6860E-03

3

2.6731E-03

8

2.6150E-03

4

2.6331E-03

9

2.5578E-03

5

2.6770E-03

10

2.6331E-03

Muestra (n):

10

Promedio:

2.6270E-03

Desviación estándar (S):

5.1817E-05

- Porcentaje de recuperación:

Tabla N° 4 porcentaje de recuperación

Muestra recuperada Nº

Absorbancia promedio de 1ppm

Absorbancia a 265nm

Porcentaje recuperación

1

3.3629E-02

3.1907E-02

94.8794

2

3.3629E-02

3.1277 E-02

93.0060

- Reporte estadístico

Regresión Simple - ABSORBANCIA 265nm vs. CONCENTRACION ppm

Variable dependiente: ABSORBANCIA 265nm

Variable independiente: CONCENTRACION ppm

Lineal: Y = a + b*X

Tabla N° 5 Coeficientes

Mínimos Cuadrados

Estándar

Estadístico

Parámetro

Estimado

Error

T

Valor-P

Intercepto

-0.0082785

0.00159702

-5.18371

0.0004

Pendiente

0.0422089

0.0011663

36.1905

0.0000

[pic 1]

Tabla N° 6 Análisis de Varianza

Fuente