Toxicologia PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

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Los grupos sulhidrilos son también importantes para la respuesta de los nitratos vasodilatadores empleados en el tratamiento de las enfermedades isquémicas del miocardio. Es bien sabido que el uso prolongado de los nitratos induce tolerancia con pérdida de efectividad. Se cree que esta inducción de tolerancia se debe a la depleción de glutation y otras sustancias que llevan grupos SH, por lo que la administración de acetilisteina puede restaurar la eficacia de los nitratos.

3) metodologías analíticas que se deben aplicar para garantizar el éxito en la investigación de medicamentos.

Metodología en la investigación

La mera observación de situaciones donde aparecen dificultades sin resolver es el origen o embrión de un problema a investigar. Planteada la existencia de esta necesidad, el proceso reflexivo comienza con la identificación de un problema concreto, cuyo estudio requiere realizar previamente las siguientes actividades:

- Analizar toda la información existente sobre el tema, ya sea previamente conocida o la procedente de investigaciones previas o de la que se esté realizando en el momento en que se ha procedido a la selección del tema.

- Identificar las posibles contradicciones con la experiencia.

- Este será el momento de determinar si se trata de un problema digno de estudio y apto para ser abordado con los recursos disponibles. En caso afirmativo, el paso siguiente consistirá en definir el problema, es decir, especificarlo con detalle y precisión, de modo que sus implicaciones se hagan patentes y se pongan de relieve sus limitaciones, siendo con frecuencia necesario revisar estudios previos con objeto de determinar con exactitud lo que se ha de hacer. Para ello será necesario individualizarlo, distinguiéndolo en lo posible de cuestiones análogas que puedan estar en conexión con el mismo. A continuación, y una vez el problema se ha planteado y definido, todo proceso de investigación debe seguir una metodología que de acuerdo con Sharpe(3) incluye las siguientes etapas:

- Definición de la población a estudiar, que debe estar de acuerdo con los objetivos que se desean alcanzar. La muestra definida debe ser representativa de la población global a la que posteriormente se querrán aplicar los resultados de la investigación.

- Selección de la muestra representativa. El tamaño de la muestra a seleccionar depende de factores tales como la intensidad del efecto a medir, el establecimiento de grupos dentro de la población o las variables a estudiar que pueden actuar de forma simultánea. Es importante que la selección sea representativa tanto en cantidad como en cualidad de los sujetos seleccionados. En general y en una situación particular, será necesario aplicar un tratamiento estadístico que permita estimar el número mínimo de sujetos que se deben incluir en la muestra. Si la selección se obtiene de forma randomizada, los resultados obtenidos podrán ser generalizados a la población objeto de estudio, ya que se eliminará toda predisposición deliberada sobre las características que debe poseer la muestra. En aquellos casos en que se presuponga que las variables a estudiar pueden tener diferente influencia sobre cada uno de los grupos establecidos o cuando no se quiera excluir de la muestra grupos muy pequeños de la población, puede dividirse ésta en varios grupos, siendo la muestra de cada uno de ellos acorde con su presencia en la población.

- Asignación randomizada de los sujetos a los grupos de estudio. El diseño del estudio, será más o menos complejo en función de las variables a estudiar y respetando como limitaciones más importantes que cada grupo (experimental/es y control) en que se halla dividido la muestra tengan igual número de sujetos y que la incorporación de éstos al estudio se realice en general de forma equilibrada en el tiempo. Una vez definidos los grupos, la asignación de los sujetos a los mismos deberá realizarse de forma randomizada (aleatoria), siguiendo un proceso mediante el cual cada sujeto del estudio tiene la misma probabilidad estadística de ser asignado al grupo en que se va a ensayar la intervención (estímulo o tratamiento) o al grupo control.

- Aplicación del estímulo o tratamiento, tanto al grupo experimental como al grupo control. Deben para ello estar perfectamente definidas las especificaciones sobre la naturaleza del estímulo y las condiciones bajo las que se aplica para garantizar una adecuada medida de la respuesta y que los resultados sean reproducibles para todos aquellos que deseen repetir la experiencia.

Etapa 1 Etapa cuidadosa de la población a estudiar[pic 31]

Etapa 2 Selección de la muestra representativa obtenida por randomización[pic 32][pic 33]

3 Etapa Asignación randomizada de los sujetos/objetos[pic 34][pic 35]

4 Etapa[pic 36][pic 37][pic 38][pic 39][pic 40]

5 Etapa[pic 41][pic 42][pic 43][pic 44][pic 45]

6 Etapa[pic 46]

7 Selección[pic 47][pic 48]

Es por ello importante, que en el diseño se haga un esfuerzo en conseguir el aislamiento del estímulo que se va a aplicar respecto de otras variables o situaciones que puedan confundir posteriormente la medida o interpretación de los resultados obtenidos (contaminaciones cruzadas).

Medida de las observaciones. La medida de la respuesta al estímulo (resultados) debe ser convenientemente especificada y cuantificable, y además debe aportar veracidad y validez. La veracidad de una medida hace referencia al grado de consistencia de los resultados obtenidos y refleja la relativa ausencia de errores no sistemáticos. El origen de estos errores puede ser (4):

1. Sujeto: el comportamiento, motivación, fatiga..., del sujeto pueden afectar de forma puntual a su actitud y dar lugar a cambios no sistemáticos en la respuesta.

2. Observador: los mismos factores anteriormente mencionados pueden afectar a la persona que realiza la medida de las respuestas.

3. Situación: mediante la modificación de las condiciones bajo las cuales se realizan las medidas, lo que puede dar lugar a resultados que no reflejen exclusivamente los cambios producidos en los grupos experimental y control atribuibles únicamente a la aplicación del estímulo.

4. Instrumental: como consecuencia de manipulaciones incorrectas de los instrumentos de medida o por ausencia de una validación previa