TÉCNICAS EN BIOTECNOLOGÍA. PRÁCTICA 1-2.

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CONCLUSIÓN

Las células cultivadas de la línea celular SF21 no fueron óptimas para realizar una prueba de actividad citotóxica, puesto que la mayoría de las células halladas en el cultivo no son viables. Esto puede deberse a que el cultivo se encontraba contaminado, a que las células estaban estresadas u otras razones. El estrés celular se hizo evidente debido a que varias células contenían vacuolas y sus membranas se observaban rugosas, algunas también hicieron lisis. La contaminación del cultivo se hizo notorio por la turbidez y la presencia de gases en el recipiente. La concentración de células en un volumen de solución es muy bajo al igual que el porcentaje de viabilidad inicial. Se debe garantizar la esterilidad del cultivo para llevar a cabo las pruebas de actividad citotóxica.

- Ensayos cultivos celulares Biomédicos.

Existen varios tipos de aplicaciones a nivel de los cultivos celulares con el fin de realizar ensayos biomédicos, dentro de los cuales se pueden destacar los cultivos de Células madre, caracterizándose por utilizar a las células madres inmaduras para desarrollarse y especializarse en células nerviosas, células sanguíneas, musculares y prácticamente cualquier otro tipo de célula del cuerpo. Las células madre pueden cultivarse en el laboratorio y cuando se tratan con diferentes productos químicos, pueden estimularse para que se desarrollen en diferentes tipos de tejido humano, que por ejemplo podrían usarse para el trasplante de tejidos dañados (Thieman & Palladino 2010). Otro ejemplo a destacar es el crecimiento y formación completa de órganos a través de implantes de células madre en animales como el cerdo para poder tener órganos humanos, disponibles para emergencias médicas (BBC). La industria farmacéutica por años ha invertido gran capital y esfuerzos en desarrollar medicamentos que sean óptimos para esto, realizando ensayos en tejidos humanos en laboratorios (Wang et al. 2016), dentro de las pruebas que han realizado resaltan las de vacunas para distintas enfermedades, como medicamentos que ataque el cáncer (Sporn 2016).

- Viabilidad de las células

Una suspensión celular se caracteriza por presentar un número de partículas dispersas en un fluido. Habitualmente será necesario determinar tanto la densidad de las células en la suspensión, así como el porcentaje de éstas que son viables. Para determinar la densidad de las células se emplean diferentes técnicas, una de ellas es la cámara de contaje celular de la que existe numerosas variantes, entre ellas la cámara de Neubauer. Está cámara de conteo se adaptada al microscopio óptico. La cámara consta de un cubre objetos de cuarzo, con una depresión en el centro, y con una cuadricula marcada. Normalmente las células se les realizan ensayos para determinar la viabilidad de las mismas, con el fin de obtener si son óptimas o no para su posterior manipulación. Para determinar la viabilidad celular se emplean el método de tinción con azul tripano. El azul tripán es un colorante vital que se introduce en el interior de las células que presentan ruptura o daño en la membrana plasmática, lo cual indica que ya no son útiles, no obstante las células que aparecen en el microscopio, de color azul, son consideradas no viables, en contraposición de las no teñidas, las cuales se encuentran en buen estado, impidiendo la entrada de colorante y considerándose viables.

BIBLIOGRAFÍA

http://www.bbc.com/mundo/noticias/2016/06/160606_salud_organos_humanos_cerdos_trasplantes_ucdavis_ch visto: 16:09. 22/08/16

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Lucas A, M Aguirre, E Aquino, J Aizpuru, R Gualberto & N Brandan. 2005. Análisis diferencial de Celularidad, Viabilidad, Apoptosis y Mitosis en médula ósea murina tratada con diferentes dosis de Etopósido. Universidad Nacional del Nordeste. Argentina. 4pp.

Martínez J. 2002. Prueba de viabilidad de neutrófilos para la detección de sustancias tóxicas en extractos de plantas como fuente de alimento en los animales. Tesis para optar por el título de maestra en ciencias pecuarias. Universidad de Colima.

Sporn M. (2016). Commentary on Eagle and Foley: “Cytotoxicity in Human Cell Cultures”. Cancer research, 76(5), 989-990.

Thieman W & Palladino M. (2010). Introducción a la biotecnología. Madrid. 408 p.

UASLP. 2011. Conteo y evaluación de la viabilidad de células mononucleares protocolo y métodos. Facultad de medicina.

Wang B, L Hu, & T Siahaan. (2016). Drug delivery: principles and applications. John Wiley & Sons.