COMO SE DA LA TOMA DE MUESTRA SANGUÍNEA VENOSA – DESPROTEINIZACIÓN

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

“Año del Diálogo y Reconciliación Nacional”

FACULTAD DE MEDICINA

ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGÍA MÉDICA

[pic 1]

TEMA:

TOMA DE MUESTRA SANGUÍNEA

VENOSA – DESPROTEINIZACIÓN

ASIGNATURA: BIOQUÍMICA

DOCENTE: DORIS HUERTA

ALUMNA: CUMPÉN COJAL, SOFIA ALEXANDRA

LIMA – PERU

2018

CUESTIONARIO.

1. Comente y explique los resultados del paso 3.

La desproteinización es la remoción de proteínas de la sangre, suero o plasma para obtener un filtrado libre de proteínas y poder cuantificar la muestra sin interferencias para evitar la formación de espuma, turbidez, precipitado.

Para comenzar esta práctica realizamos la extracción de sangre al compañer@, para luego dejarlo reposar en baño maría a 37°C por 5 minutos y luego se proceda a centrifugar para obtener el suero. Una vez obtenido el suero de cada tubo, hemos juntado todos los sueros en un solo tubo y hemos extraído 5ml en 4 tubos.

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Cada tubo lleno de suero fue agregado con 4 reactivos: Solución de Folin-Wu, TCA 5%, sulfato de amonio y solución picrato alcalino.

Como podemos ver en la imagen se aprecia el suero sin juntarse con los reactivos.

[pic 3]

• La solución de Folin-Wu se funda en la formación de un precipitado de óxido cuproso al reaccionar el filtrado libre de proteína con una solución cúprica alcalina bajo la acción del calor.
•  No solo con el ácido tricloroacético, sino con todos los ácidos las proteínas se desnaturalizan y se precipitan.
  El ácido tricloroacético es un desnaturalizante que interfiere con los enlaces hidrofóbicos.

• La precipitación de sulfato de amonio es un método utilizado para purificar proteínas alterando su solubilidad. Se utiliza comúnmente ya que su solubilidad es tan alto que se permiten soluciones de sal con alta fuerza iónica.[pic 4]
• El ácido pícrico forma cristales incoloros o ligeramente amarillos. Debido a la acumulación de grupos nitro (-NO2) , el grupo hidroxilo del ácido pícrico lo convierte en un ácido fuerte , capaz de reacciones de intercambio con la formación de sales metálicas (picratos).

En esta imagen observamos los precipitados que también se conocen como PELET cuando hemos eliminado el sobrenadante.[pic 5]

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Luego hemos agregado 3ml de suero fisiológico (NaCl al 0,9%) que carece de elementos proteicos y se define como una disolución acuosa de sal de mesa en agua, hasta cierto grado compatible con los organismos vivos debido a sus características definidas de osmoticidad, pH y fuerza iónica.

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Para finalmente agregar los 0.5 ml de NaOH de 0.4 mol/L (El NaOH al ser una base, aumenta el pH con lo cual se produce esta desnaturalización) y culmina este largo proceso.