ANÁLISIS DE UNA NUCLEOPROTEÍNA

...

Parte #5: Identificación de las bases puricas.

Al agregar los 2 ml del hidrolizado al tubo de ensayo, se añadió las 6 gotas de amoniaco concentrado para alcalinizar pero no dio el resultado; por lo que se agregó 5 gotas más dando un total de 11 gotas, resulto un pH de 8 y no 10 que era lo que se esperaba. También se observó que al añadir amoniaco se liberó calor. Luego cuando se agregó Nitrato de Plata se dio el precipitado blanco en forma de copos aunque no por completo y se obtuvo las sales de plata y las bases puricas.

[pic 3]Figura #3: Solución de Base purica y sus componentes.

Parte #6: Identificación del Ácido Fosfórico.

Cuando agregamos el molibdato de amonio al hidrolizado cambio a un color amarillo, al añadirse ácido ascórbico la temperatura subió, después de 5 minutos tomo un color amarillo verdoso, a los 20 minutos se puso color chocolate esperamos más tiempo pero no logramos observar la coloración azul que nos indica la presencia de fosfatos por lo que deducimos que fue una reacción negativa.

[pic 4]Figura #4: solución Ácido fosfórico.

Discusión

Parte 1: Extracción de una nucleoproteína a partir de la levadura.

En la extracción de la nucleoproteina el éter mas la arena de vidrio hace que rompan los enlaces de hidrógeno de las macromoléculas, para la posterior desnaturalización de las proteínas.

En la primera parte de la centrifugación se obtiene en el sobrenadante: carbohidratos y ARN, y en el precipitado: éter, arena de vidrio y DNA que es la parte desechada. En este proceso la proteína no esta completamente desnaturalizada, por lo que se le agrego el acido acético y se agita y se centrifuga una vez mas para obtener sólo la parte precipitada

Parte #2: Hidrolizar la nucleoproteína.

En la hidrólisis se agrega acido suulfurico y se calienta. estos dos factores comunes de desnaturalización juntos (acido, y calor) nos sirven para determinar que hemos hidrolizado las proteínas.

Parte #3: Identificación de proteínas sencillas.

Prueba de Biuret:

La prueba de de Biuret se da cuando los iones cúpricos son unidos por los enlaces peptídicos a pH alcalino.

En esta prueba nos dio negativa ya que se obtuvo un color azul en vez del color purpura característico de esta reacción.

Esto se dio por qué no se obtuvo el pH adecuado para realizar la prueba y obtener el resultado positivo.

Parte #4: Identificación de las Pentosas.

El reactivo de Fehling , se da en un medio alcalino para reconocer la existencia de azucares reductores, dando una coloración roja amarilla de óxido cuproso.

La prueba resulto negativa por que se obtuvo un precipitado color chocolate en ves del color rojo amarillo, esto se debió a que el pH se obtuvo fue muy bajo un pH 3 en vez del pH 7.

Parte #5: Identificación de las bases puricas

Para esta prueba pudimos determinar una prueba positiva ya que se observo claramente un precipitado de color blanco. Pero pudo formarse mas precipitado si se hubiera obtenido un pH 10 ya que obtuvimos un pH 8.

En el precipitado estaban las sales de plata y bases puricas.

Parte #6: Identificación del Ácido Fosfórico

Al hidrolizado le agregamos 3 ml de molibdato de amonio. Cuando agregamos el acido ascórbico la ocurrió una reacción exotérmica por que se libero energía en forma de calor. Una reacción exotérmica es una reacción química que desprenda energía, ya sea como luz o como calor, o lo que es lo mismo: con una variación negativa.

Utilizamos en dos pruebas una que contenía ácidos ascórbico al 0,2 % y otra al 0,4%. La prueba resulto negativa por que la preparación del acido ascórbico y a los tubos que contenían las muestras se llenaron de agua.

Preguntas de Evaluación

- Explique en que consiste la descomposición hidrolitica de las nucleoproteínas

Consiste en la liberación de proteínas y luego en la despolimerización de los ácidos nucleícos luego, se hidrolizan los mononucleótidos en las pentosas, bases nitrogenadas y el acido fosfórico.

- ¿Qué características químicas presentan las histonas y las protaminas?

Las histonas: son proteínas básicas, de baja masa molecular, muy conservadas evolutivamente entre los eucariotas y en algunos procariotas. Forman la cromatina junto con el ADN, sobre la base de unas unidades conocidas como nucleosomas.

Las protaminas son proteínas de bajo peso molecular con un alto contenido del aminoácido arginina en su estructura, siendo su principal fuente de extracción los testículos de ciertas variedades de salmón. Estas proteínas se unen a la heparina formando complejos que neutralizan su efecto, sin acción anticoagulante. La protaminas: no anula el efecto de los anticoagulantes cumarínicos orales. La protamina es inactivada enzimáticamente en el plasma, se elimina preferentemente por vía renal y, en menor medida, por vía hepática y biliar.

- ¿Qué características químicas presentan las albuminas y globulinas?

Albuminas:

- Mantenimiento de la presión oncótica.

- Transporte de hormonas tiroideas.

- Transporte de hormonas liposolubles.

- Transporte de ácidos grasos libres. (Esto es, no esterificados)

- Transporte de bilirrubina no conjugada.

- Transporte de muchos fármacos y drogas.

- Unión competitiva con iones de calcio.

- Control del pH.

- Funciona como un transportador de la sangre y lo contiene el plasma.

Globulinas:

Las globulinas son un grupo de proteínas solubles en agua que se encuentran en todos