Analisis microbiologico de ambientes

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Es un medio rico en nutrientes, y no contiene inhibidores del crecimiento bacteriano.

El extracto de carne y la peptona, son la fuente de carbono y nitrógeno, mientras que la lactosa es el hidrato de carbono. Por la fermentación de la lactosa, se produce ácido y gas, y éste último se demuestra al usar las campanas Durham.

Se lo usa también como medio de pre enriquecimiento, porque permite recuperar células injuriadas, diluye sustancias tóxicas o inhibitorias y favorece el desarrollo de Salmonella con respecto a otras bacterias.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Extracto de carne

3.0

Suspender 13 g por litro de agua destilada. Mezclar bien y distribuir en tubos con campanitas de Durham. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121°C.

Peptona

5.0

Lactosa

5.0

pH final: 6.9 ± 0.2

- Caldo verde brillante:

Este medio está recomendado para el recuento de Coliformes totales y fecales, por la técnica del número más probable.

En el medio de cultivo, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y Gram negativas a excepción de Coliformes, y la lactosa es el hidrato de carbono fermentable.

Es una propiedad del grupo Coliformes, la fermentación de la lactosa con producción de ácido y gas.

Fórmula (en gramos por litro)

Instrucciones

Bilis de buey deshidratada

20.0

Suspender 40 g del polvo deshidratado por litro de agua destilada. Disolver y distribuir 10 ml por tubo con campanita de Durham. Preparar además, el medio a doble concentración. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

Lactosa

10.0

Peptona

10.0

Verde brillante

0.0133

pH final: 7.2 ± 0.2

- Agar PCA:

Caseína enzimática hidrolizada provee aminoácidos y otros complejos de sustancias nitrogenadas. Extracto de levadura, provee complejo de vitamina B. las muestras son diluidas y diluciones apropiadas son adicionadas en las cajas de Petri. El agar fundido estéril es adicionado a las cajas de Petri y son rotadas suavemente para asegurar una mezcla uniforme de la muestra con el agar. El método del agar vertido sobre las cajas de Petri es preferido al método de inoculación en superficie desde que este de muy buenos resultados. El agar Plate Count es también adecuado para la enumeración y recuento bacteriano en cuartos estériles.

- Agar Mac Conkey:

En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.

Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares.

Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.

- Agar Papa Dextrosa:

Medio de cultivo adecuado para el aislamiento y recuento de hongos y levaduras en alimentos, productos farmacéuticos y otros materiales de importancia sanitaria.

En un medio de cultivo nutritivo no selectivo, en el cual la infusión de papa y la glucosa favorecen el desarrollo exuberante de hongos y levaduras. El agar es el agente solidificante. Es diferencial en base a la producción de pigmentos por los microorganismos que crecen en el mismo. Puede lograrse un medio selectivo si al medio de cultivo una vez esterilizado se lo lleva a pH final: 3.5 ± 0.2 mediante el agregado de ácido tartárico.

- Etanol 70%:

Usado exclusivamente para desinfección del área de trabajo y de los equipos.

- Diagrama de Flujo:

- Preparación de Diluyentes y Agares:

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- Esterilización de todo el material a usar, diluyentes y agares:

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- Preparación de la muestra a analizar:

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- Recuento total de Bacterias Mesófilas Aerobias Viables:

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