Como se da Cromatografía en capa fina
Enviado por Jillian • 19 de Diciembre de 2018 • 670 Palabras (3 Páginas) • 317 Visitas
...
Primeramente la maceración del chile pasilla se concentró con ayuda de un rota vapor y después se procedió a preparar la columna. Se utilizó una bureta de 25 mL, en ella se colocó un disco de algodón en el fondo y después se agregó un poco de sal hasta conseguir una altura de aproximadamente 1 cm, a continuación se preparó una suspensión de la sílice gel para columna con tolueno y se procedió a empaquetar la columna agregando esta suspensión a la bureta hasta haber conseguido una altura de aproximadamente 10 cm, seguido del adsorbente se agregó un poco más de sal, de igual manera 1 cm de altura.
A continuación se aplicó la muestra del chile pasilla a la columna y en seguida se agregó 5 mL de tolueno y se observó la separación de los colores amarillo, anaranjado, rojo y verde, en la parte superior de la columna se quedaron unas tonalidades muy oscuras, así que se agregó una solución 10% acetona y 90% tolueno, y así se continuo la separación por gradientes:
- 20% Acetona 80% Tolueno
- 40% Acetona 60% Tolueno
- 50% Acetona 50% Tolueno
- 70% Acetona 30% Tolueno
- 100% Acetona
Cuando finalmente se colectó el eludido y consideró una separación completa, se procedió a realizar una cromatografía en columna para valorar la separación realizada en columna.
Primero se prepararon las placas cromatografías y en cada una de las placas se aplicaron 3 muestras de los diferentes eludidos colectados. A continuación se introdujeron las placas en las cámaras de elución, las cuales contenían una disolución 10% acetona y 90% tolueno.
Resultados[pic 2]
[pic 3]
[pic 4]
[pic 5]
[pic 6]
Muestra
Rf
Resultado
1
5.5cm/6.3cm
0.8730
2
5.5cm/6.3cm
0.8730
3
5.5cm/6.3cm
0.8730
4
5.6cm/6.5cm
0.8615
5
5.6cm/6.5cm
0.8615
6
5.6cm/6.5cm
0.8615
7
5.5cm/6.3cm
0.8730
8
4.5cm/6.3cm
0.7142
9
4.2cm/6.3cm
0.6666
10
3cm/3.5cm
0.8571
11
2.5cm/3.5cm
0.7142
12
2.2cm/3.5cm
0.6285
...