La Cromatografia de capa fina

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Cuando se trata de compuestos que no consiguen absorber la luz UV, la visualización del cromatograma necesita usar un agente revelador. Dicho revelador debe reaccionar con los productos que son absorbidos dando compuestos de colores. Por lo cual, el revelador a usar depende del tipo de compuesto que queramos visualizar.

Algunas de las desventajas de la cromatografía en capa fina son las siguientes:

-Hay que tener presente la volatilidad de los disolventes cuando se escojan sistemas de disolventes para su uso en ciertos climas.

-Algunos disolventes son potencialmente peligrosos para la salud y el medio ambiente; así, habrá de tenerse cuidado en su elección (por ejemplo, cloroformo, benceno, éter).

Material y método

- Equipo, materiales

- Capilar

- Vaso de precipitados

- Laminas cromatográficas

- Luz ultra violeta

- Perilla de succión

- Pipeta

Concentración de la Solución

RF

9:1

0

8:2

0.1136

7:3

0.4286

6:4

0.6744

- REACTIVOS

- Acetato de etilo

- Hexano

- Fluoresceína

Se prepararon cuatro muestras de diferente composición entre hexano y acetato de etilo, cada una de las cuales contenida en 2ml en relación 9:1, 8:2, 7:3 y 6:4.

El método usado para llevar a cabo la cromatografía fue el siguiente:

Primeramente se limpia el capilar con acetato de etilo, para esto se debe humedecer el mismo y luego secar, este procedimiento se repite tres veces.

Para preparar la placa se debe hacer una marca en el lugar donde se va a depositar la fluoresceína, a fin de poder medir el desplazamiento respecto de ésta. Al ponerla se debe únicamente tocar la placa y retirar de inmediato, no se debe dejar tiempo en contacto.

Finalmente se introduce la placa en la solución que se quiere determinar, se deja ahí hasta que la mezcla suba (por capilaridad) hasta poco antes del límite superior de la placa.

Se debe tener cuidado que la placa esté lo más vertical posible, esto sin que esté completamente pegada a la pared del recipiente que contenga la muestra a separar y analizar.

Para revelar las manchas que dejaron los compuestos de la mezcla en la placa sólo se coloca ésta en un revelador de rayos UV o una solución de yodo o se rocía con un poco de ácido sulfúrico 1:1.

Resultados y Discusión

A partir de la fórmula dada para calcular el Rf estos fueron los datos obtenidos para cada solución por cada equipo:

Con estos datos se puede realizar una gráfica que nos muestre el comportamiento del Rf en función de la concentración de hexano:

[pic 4]

Gráfica 1. Comportamiento Rf

En la gráfica, podemos observar el comportamiento esperado en la separación del compuesto, ya que mientras mayor es la composición de hexano (compuesto no polar) obviamente la presencia del acetato de etilo (compuesto polar) es menor, por lo que la mayor parte de la mezcla queda en el indicador, es decir, la fluoresceína, debido a la similitud de polaridades.

Así, se observa que al aumentar la concentración de acetato de etilo (porque disminuye la de hexano) el Rf es mayor, debido a que se observa un mayor desplazamiento.

Si nos detenemos a observar el primer dato de la tabla, o el punto de mayor concentración de hexano en la gráfica, nos daremos cuenta que cuando hay poco acetato en la solución, no hay valor del Rf, debido a que el desplazamiento es nulo, es decir, no lo hay, por lo que podemos inferir que la concentración de acetato es tan baja que es prácticamente absorbida por el hexano y no presenta separación alguna, como si la solución fuera sólo de hexano.

Por tanto, se obtuvo el comportamiento esperado, mismo que se constata tanto en la tabla de resultados como la gráfica que muestra el comportamiento del Rf como función de la concentración.

Conclusiones

Con este trabajo de separación cromatográfica pudimos conocer, observar y realizar los pasos y técnicas necesarios para llevar a cabo una cromatografía en capa fina (CCF).

De la misma manera, se logró observar que este método nos ayuda a conocer los componentes de una mezcla, debido a la separación que experimentan cada uno por separado.

Referencias

Solomons, Graham; Química Orgánica, segunda edición, Limusa, México, 2002

Morrison, Robert, T., Et Al; Organic Chemistry, third edition, Allyn and Bacon Inc, USA, 1979