Cuantificacion de proteínas totales

...

[pic 10]

P1 (1,2 ; 0,1431)

P2 (2,4 ; 0,2459)

P3 (3,5 ; 0,4932)

P4 (4,0 ; 0,4032)

2.-Hallar gráficamente la concentración de las proteínas totales (mg/dl) en el suero sanguíneo utilizando la curva patrón.

Para hallar P5 : -Abs = 81,4636 (0,00349) + 0,0374

-Abs = 0,3617

X = 3,49 P5 = (3,49 ; 0,3617)[pic 11][pic 12]

Para p.t P5 (3,49 ; 0,3613)[pic 13]

3.- Hallar la concentracion de las proteínas totales (mg/dl) en suero utilizando los datos del tubo estándar 2.[pic 14]

PT = P x F

P = Absorbancia de la muestra

F = Estandar[pic 15][pic 16]

Abs. Estandar[pic 17]

P = 0,4032

F = 2,4 mg = 3,667 mg/dl[pic 18]

0,2769

PT = 0,4032 x 8,667 mg/dl = 3,49 mg/dl

4.- Explique el fundamento en la reacción de Biuret con las proteínas

En una muestra de producto químico utilizado para detección de la presencia de enlaces peptídicos. En presencia de péptidos un ion cobre en forma complejos de coordinación da color violeta en una solución alcalina.

Varias de las pruebas han sido desarrolladas, tales como el ensayo de BCA, el ensayo de Lowry utilizando:

Se utiliza para evaluar la concentración de proteínas.

La intensidad de color y por lo tanto la solución es 540 nm siendo directamente proporcional a la concentración de proteínas de acuerdo a la ley de Beer – Lambert

CONCLUCIONES:

Efectivamente, aplicando el método Biuret se puede determinar la concentración de proteína en una o varias muestras problema, que resultan al interpolar los valores de absorbancia en una curva patrón originada a partir de concentración de proteína conocida.

HIDROLISIS ACIDA ESCALONADA DEL ALMIDON

CUESTIONARIO:

1.- indicar la escala de coloración que se produce en cada tiempo al hacer la prueba con lugol.

El color que se produce es de un color azul marino a un café oscuro y poco a poco iba perdiendo su color al transcurrir el tiempo en los tubos la cual indicaba que los polisacáridos iban siendo hidrolizados para esta prueba hasta llegar a un color medio amarillento.

2.- mencionar el tiempo que demora la hidrolisis completa del almidón.

Se hidroliza en un tiempo de 6 minutos.

3.- la hidrolisis acida del almidón en caliente y en frio producirá los mismos resultados.

No se produce los mismos resultados ya que en caliente se puede determinar si contiene azúcares reductores.

Además para la identificación del almidón en lugol es necesario enfriar la muestra.

4.- mencionar tres diferencias entre hidrolisis acida y enzimática del almidón.

Los resultados obtenidos tanto en la hidrólisis ácida como enzimática deben corresponderse con un aumento de dicha hidrólisis a lo largo del tiempo. Este aumento debe ser proporcional, aunque ésta puede perderse en los últimos minutos si ya se ha conseguido hidrolizar prácticamente todo el glucógeno de la muestra.

También se puede perder la proporcionalidad si no se añade el NaOH, en el caso de la hidrólisis ácida, o el DNS, en el de la hidrólisis enzimática, en los tiempos indicados pues no se pararía la hidrólisis de glucógeno de forma adecuada.

Existe una diferencia clara entre los valores de absorbancia a 540 nm obtenidos para la hidrólisis ácida y enzimática, siendo mucho mayores los primeros. Esto, lógicamente, es debido a que con la hidrólisis ácida se consiguen hidrolizar todos los enlaces del glucógeno mientras que con la α- amilasa sólo los α(1-4).

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