DETERMINACIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS EN FRÍJOL, LACTOSUERO

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También se evidencia que el color de las muestras de frijol y patrón son similares mientras que la de lactosuero presenta una apariencia turbia con una coloración menos intensa, al ser agregado al reactivo de Biuret, ya que se forma un complejo coloreado entre el Cu2+ y los grupos NH de los enlaces peptídicos en medio básico. 1Cu2+ se forma un complejo con 4 NH. La intensidad de coloración es directamente proporcional a la cantidad de proteínas (enlaces peptídicos) y la reacción es bastante específica, de manera que pocas sustancias interfieren. La sensibilidad del método es bajo y sólo se recomienda para la cuantificación de proteínas en preparados muy concentrados (por ejemplo en suero). (Reyes, et al, s.f), es por esto que la apariencia del tubo con lactosuero es turbia, por lo cual se podría decir que las muestras de frijol y patrón presentan una mayor cantidad de enlaces peptídicos que puedan formar el complejo de 1Cu2+ con los grupos NH.

[pic 3]

CONCLUSION

Se concluye que la absorbancia con lo que respecta a la concentración es mayor en el lactosuero, en cambio en la transmitancia el lactosuero disminuye y las muestras de patrón y frijol aumentan. Por otro lado las muestras con tonalidad más oscura son las que tienen mas enlaces petidicos, todas las muestras exceptuando la muestra en blanco dieron positivo al reactivo biuret.

ANEXOS

ME DIJERON QUE TOCA PONER LA CORRECCIÓN DE LOS DATOS

Tabla 1. Datos de absorbancia y transmitancia obtenidos en el laboratorio

Frijol

Lactosuero

Patrón

Absorbancia

0.74

1.72

0.724

Transmitancia

18.3

1.9

18.9

Tabla 2. Corrección de los datos de absorbancia utilizando la transmitancia (T) y la fórmula A=-2logT

MUESTRA

PROCEDIMIENTO

RESULTADO

Frijol

A=2-log18.3

0.7375

Lactosuero

A=2-log1.9

1.7212

Patrón

A=2-log18.9

0.7235

Tabla 3. Calculo de la concentración de las muestras utilizando la formula

[M]= A Muestra/A patrón*[P]

Muestra

Frijol

Lactosuero

Patrón

Procedimiento

[M]= 0.74/0.724*0.01

[M]= 1.72/0.724*0.01

[P]=1g/100ml

Concentración de la muestra g/ml

0.01022

0.012

0.01

[M]= Concentración de la muestra

[P]= Concentración del patrón

A= Absorbancia

BIBLIOGRAFÍA

Douglas A. Skoog, Donald M. West, Introducción a la Química Analítica, Editorial Reverté, S.A, Barcelona, 2002.

Nieves Abril Díaz, Antonio Bárcena Ruiz, et al, Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de biomoléculas, Departamento de Bioquímica y Biología Molecular,Universidad de Córdoba, s.f.

Reyes. F y Galván. A, Métodos para la cuantificación de proteínas Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Universidad de Córdoba, s.f