Desgrabacion Cromatografia

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En las polares vamos a tener acidas o básicas ya que dependiendo de la naturaleza de los componentes de la muestra se determina cual se utiliza para el análisis. Si utilizamos las fases estacionarias acidas podemos usar la de silica gel, florisil. En cuanto a las básicas podemos tener la magnesita o alumina (esta última se puede hacer reaccionar con algún compuesto para cambiar su pH).

En las no polares están las de carbón activado y sílica hidrofóbica

Fases móviles: se utilizan ciertos solventes apolares como ciclopentano, cloroformo, acetato de etilo (más utilizados), disulfuro de carbono, éter dietilico, acetona, acetonitrilo, benceno. Estos solventes se puede utilizar por individual o también se puede hacer una mezcla de ellos en diferentes proporciones. Se dice que estamos en fase normal cuando la fase móvil es no polar y en fase reversa cuando la fase móvil es polar

- Según la interacción entre los componentes de la mezcla y la FM Y FE

- Cromatografía de adsorción. Las condiciones para que esto ocurra es que se encuentre en el edo solido y liquido, ya que el solido se va adsorber en la superficie de la FE y el liquido puede fluir en la FM

- Cromatografía de partición o distribución. Ocurre en el edo liquido-liquido. para que se puede distribuir entre una fase y otra

- Cromatografía de intercambio iónico. La separación de los componentes se da por afinidad de cargas iónicas

- Cromatografía por exclusión molecular. Ocurre la separación por el tamaño de las partículas y por sus diferentes pesos moleculares de la mezcla

Cromatografía plana. Viene desde los inicios de la cromatografía donde se utilizaba un papel de filtro (hecho de celulosa) que actúa como un absorbente. En este caso a pesar de que es un papel actúa como una fase estacionaria inerte ya que la celulosa presenta interacciones de tipo puentes de H

- Según el tipo de soporte empleado para la fase estacionaria.

Cromatografria en capa fina (cromatografía plana y de capa fina) y cromatografía en columnas.

- Cromatografía plana. Viene desde los inicios de la cromatografía donde se utilizaba un papel de filtro (hecho de celulosa) que actúa como un absorbente. En este caso a pesar de que es un papel actúa como una fase estacionaria inerte ya que la celulosa presenta interacciones de tipo puentes de H

- Cromatografía de capa fina. Suplemento la cromatografía de papel donde se utilizan placas rígidas que pueden ser de plástico vidrio o aluminio que van a estas recubiertos por una pequeña capa fina de absorbente como por ejemplo sílica gel. Esta capa debe ser uniforme para no tener errores en el análisis. Vienen en unas dimensiones de 20x20cm. Si las láminas son de plástico se pueden cortar para la modificación del análisis. En la USP indica cómo se tiene que hacer cada determinación según el tipo de sustancia a analizar. Su procedimiento se inicia en que al tener el papel o la capa fina se traza una línea a 1cm desde el borde de la placa, la cual es importante que se haga con grafito para que no interactúe en el análisis. Luego señalo los puntos donde voy a colocar las muestras (llamados siempre). Para sembrar las muestras se utilizan capilares colocando unas 3 o 4 veces. Lo que se hace es colocar al lado un patrón de lo que yo quiero compararlo para verificar si es efectivamente la sustancia que estoy analizando. Esto se pone en contacto con la fase móvil que van a estar en unas cámaras cromatograficas (cámaras de vidrio). Antes de ponerla en contacto dicha cámara tiene que estar cerrada para que los vapores (que generalmente son solventes orgánicos) se condensen para favorecer las condiciones de la cámara, es decir que las presiones sean iguales en todo el espacio de la cámara. Al llevar la placa a la cámara la fase móvil tiene que estar por debajo de la línea donde se hizo la siembra de la muestra (línea de origen) , la fase móvil es capaz de recorrer unas ¾ partes de la placa por lo que se debería colocar una línea en esta distancia para estar pendiente al momento del análisis. Luego se seca y se visualizan los puntos. Se hacen un circulo alrededor de las marcas para determinar el punto medio y poder hacer la comparación. La forma como debe colocarse la placa en la cámara es en diagonal, apoyada de la pared de la cámara.

las placas pueden prepararse donde se tienen que colocar en la estufa previo al análisis por 20 min a 105°C ya que están elaboradas de sílica gel y este es un absorbente el mismo puede retener moléculas de agua en su superficie (humedad), las cuales pueden competir con los componentes de la muestra y que la misma no puedan interactuar con la placa donde no se pudiera observar la separación de la mezcla. Este proceso es lo que se conoce como activación de la placa

Cuando los componentes que se van a separar no son coloreados.(min 38,34)