Estudiar las aplicaciones de las enzimas industriale

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- Verificación de la actividad de la Renina

Medir mínimo 20 mL de leche cruda e incubarla a 37°C por 10 minutos, mientras tanto rotular tres tubos de ensayo, y adicionar los reactivos, en orden, como se indica en la tabla 2.

Tabla 2

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

1/4 de pastilla de renina

1/4 de pastilla de renina

10 mL agua destilada

Llevar los dos los tubos a un baño termostatado a 37° C durante 5 minutos

10 mL de leche preincubada a 37°C

10 mL de leche preincubada a 37°C

Mezclar rápidamente y observar cuidadosamente la formación de coágulos. Registrar el tiempo que transcurre desde el instante en que se agrega la leche hasta la formación del precipitado.

- Acción de Proteasas presentes en frutas y ablandador de carnes

Pesar cuatro gramos de gelatina sin sabor y adicione 100 ml de agua a temperatura ambiente. Marcar cuatro tubos de ensayo y adicionar 3 mL de la gelatina previamnete preparada en cada uno de los tubos. En el tubo 2 añadir inmediatamente trozos de piña fresca, en el tubo 3 adicionar inmediatamente con la microespátula una cantidad de ablandador de carne comercial, en el tubo cuatro introducir rápidamente trozos pequeños de papaya fresca. Agitar los tubos para mezclar, llevarlos a una nevera, observar los tubos cada diez minutos y verificar el proceso de gelificación durante cuarenta minutos.

Después de terminar el experimento tomar el tubo de ensayo No 1 que contiene gelatina gelificada y adiciónar media pastilla de pancreatina previamente macerada*; espere 15 minutos y observe.

*En un mortero macere la pastilla pankreoflat, use media pastilla y reserve el resto para el siguiente experimento.

Composición de la gelatina

En un tubo de ensayo mida 3mL de muestra de gelatina sin enfriar y adiciónele 2mL del reactivo de Biuret, observe los resultados.

- Verificación de la actividad de la amilasa presente en medicamentos comerciales

Rotular dos tubos de ensayo, en el tubo No 1 agregar 5mL de solución de almidón y unas gotas de lugol, la aparición de un complejo color azul le permitirán comprobar la presencia de un polisacárido.

En el tubo No 2 agregar 5 ml de suspensión de almidón y media pastilla del medicamento de pancretina (Pankreoflat), previamente macerada. Agitar y esperar algunos minutos. A continuación tomar 1mL de esta solución en otro tubo de ensayo y realizar la prueba de Benedict, para determinar la presencia de azúcares reductores.

Ensayo de Benedict.

Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solución del carbohidrato y agregue 0.1 ml del reactivo de Benedict, calentar al baño maría a ebullición. La formación de un precipitado amarillo, verde o rojizo, es prueba positiva para carbohidratos reductores. Use como patrón una solución de glucosa.

- Verificación de activad de las proteasas presentes en detergentes

Rotular los tubos de ensayo del 1 al 3. Preparar la gelatina sin sabor como en el punto anterior. Dividir la gelatina en tres porciones de 10mL, colóquela en cada uno de los tubos y déjela enfriar toda la noche.

El monitor del curso puede tener preparada la gelatina antes de la práctica.

Preparación del detergente (monitor)

Pesar 20g del detergente enzimático en polvo y colocarlo en un vaso de 250ml, medir 90mL de agua destilada a continuación disolver el detergente en el agua. Sí el detergente es líquido medir con una pipeta graduada 20mL.

El monitor le entregará los tubos con gelatina, marcar el nivel de gelatina en cada uno de los tubos con un marcador y adicionar en el tubo uno, 1mL del detergente que quiere analizar, en el tubo dos, 2mL del mismo detergente y en el tubo tres, 1mL de agua destilada. Dejar los tubos en reposo por 24 horas. Observar qué ha ocurrido con el gel y anotar los resultados.

- Verificación de la actividad de la invertasa

Preparar 3g de levadura fresca en 20mL de agua destilada, dejarla en reposo por veinte minutos.

(El monitor puede preparar la levadura para todo el curso, al inicio dela práctica).

Preparar tres tubos de ensayo y adicionar los reactivos de acuerdo con la tabla 3.

Tabla 3

Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

3 ml Solución 0.25M de sacarosa

3 mL de agua destilada

3mL de la solución con levadura Fresca

6mL de la solución con levadura fresca

3mL de la solución con levadura

fresca

Esperar quince minutos. Tomar 2 mL de muestra de cada uno de los tubos y adicionar 1mL de reactivo Benedict, llevarlos a ebullición en baño Maria por tres minutos y observar los resultados.

Si tiene dudas sobre los resultados del ensayo haga un ensayo de Benedict por separado para una solución de glucosa.

- Verificación de la actividad de las pectinasas en al elaboración de jugos

Tomar dos vasos de precipitados y en cada uno colocar 25mL de jugo de mango, en uno de ellos agregar 200μl de pectinasa y en el otro 200 μl de agua destilada. Agitar fuertemente usando una espátula o con un agitador magnético, esperar 15 minutos. Poner una gasa doblada en varias capas en un embudo de filtración y colocar el embudo sobre en una probeta, con la ayuda de la espátula, verter el contenido de cada vaso de precipitados en el embudo de separación y recoger el filtrado. Registrar la cantidad de jugo recogido en cada probeta y qué tan traslucido