Hidrólisis ácida del almidón y extracción e identificación de las lecitinas y el colesterol a partir de la yema de huevo de gallina

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7. A la gota que se puso en el tubo #1 se agregó una gota de yodo.

Resultado = complejo de yodo – almidón de coloración azul.

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8. Se anotó el tiempo en que la solución empiezo a hervir en este momento se tomó con una pipeta otro poco de la solución y se colocó una gota en el microtubo #2 y tres gotas en el tubo #2.

9. Se agregó inmediatamente una gota de solución de yodo al microtubo #2.

Resultado = la intensidad del color varia; la tonalidad azul bajo.

[pic 14]

10. A los dos minutos exactos de haber comenzado a hervir la solución se repitió la operación, se tomó un poco de la solución y se dejó una gota en el microtubo #3 y el tubo #3. Se agregó solución de yodo al microtubo #3.

Resultado = empezó a tornarse algo café la coloración.

[pic 15]

11. Esta operación se repitió cada dos minutos hasta que la reacción yodo almidón fuese negativa, es decir que dé el color café del yodo no el azul del complejo yodo almidón.

Resultado = Coloración café oscura y homogénea.

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12. En ese momento se terminó el calentamiento de la solución.

13. Se agregó 3 ml de la solución de Fehling a todos los tubos que recibieron gotas de la solución.

14. Se preparo un baño de agua hirviendo en un beaker de 250 ml y se colocaron en el todos los tubos de ensayo y microtubos.

15. Se esperó cinco minutos y se sacaron todos los tubos y se colocaron en la gradilla de acuerdo a su numeración.

Resultado = se observó que la prueba fue negativa debido a que no se formó ninguna coloración rojo ladrillo o naranja. La coloración azul del reactivo fehling en cada una de las muestras persistió.

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Análisis de Resultado Parte A.

La separación de las lecitinas en la solución etérea se utiliza acetona ya que las lecitinas, cefalinas y esfingolipidos son solubles en éter, etanol o cloroformo, pero insolubles en acetona y por este motivo precipitan de la solución. De esta manera se separa el colesterol para luego identificarlo.

En la identificación del colesterol la coloración verde es debido a que este sufre una oxidación gradual, formándose en cada etapa una molécula de colestapolieno que posee un doble enlace adicional con respecto al compuesto del cual deriva. La etapa inicial de la reacción consiste en la protonacion del grupo OH del colesterol, con la consiguiente pérdida de agua obteniéndose el ion carbonio 3,5-colestadieno que constituye el primer paso de la reacción de color. La oxidación secuencial de este ion carbonio alílico por el SO2- produce un ácido colesta-hexano-sulfónico.

El anhídrido acético puede condensarse con los grupos hidroxilo de la posición 3 del colesterol, 6 esteroides relacionados produciendo un éster. Si el esterol contiene una instauración en la posición 5 ocurrirá una epimerizacion a la forma 3 y una deshidratación con la formación de un color característico (un azul verdoso que pasa a verde). La reacción sirve como una prueba específica para los 3-hidroxiesteroides con una instauración en la posición 5.

Análisis de resultados Parte B.

Con respecto a la coloración azul inicial para el almidón, se debe a que el yodo se fija en las hélices de la estructura interna de este mismo (amilosa) para formar cadenas de poli yoduro.

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A medida que pasa el tiempo y el calentamiento la coloración se torna café debido a que el almidón se fragmenta en sus monosacáridos, uno de ellos glucosa. La prueba final de Fehling fue negativa debido a que el color azul del reactivo prevaleció, en caso de que hubiese resultado positiva la coloración tuvo que cambiar a rojo ladrillo o naranja debido al precipitado de óxido cuproso.

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Conclusiones

- La extracción de las lecitinas y el colesterol a partir de la llema de huevo de la gallina se realizó mediante fundamentos de solubilidad, precipitación y centrifugación. Aparte de la extracción se reconoce que este tipo de alimento tiene alto contenido lipídico, algo muy relevante debido a la cantidad del consumo de colesterol en la dieta diaria.

- Cabe mencionar que el colesterol fue un producto de la hidrolisis de la Lecitina.

- La hidrolisis acida del almidón realizada de manera fragmentada es un método diferente para obtener e identificar glucosa de manera indirecta, teniendo en cuenta que las plantas realizan este proceso por métodos enzimáticos que involucran energía.