INFORME AMILA SALIVAL PRACTICO
Enviado por Albert • 21 de Agosto de 2018 • 1.667 Palabras (7 Páginas) • 244 Visitas
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Después de los 10 minutos añadimos 500 µl de Lugol a cada tubo y realizamos la lectura de la absorbancia en el espectrofotómetro a 590 nm para determinar la concentración de almidón en cada tubo.
Experimento 2: Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática
En 4 tubos de ensayo añadimos a cada uno 1 ml de solución saliva diluida e incubar por 5 minutos cada tubo a la temperatura correspondiente: Tubo 1: 0° grados, tubo 2: Temperatura ambiente, Tubo 3: 37° grados y Tubo 4: 90° grados.
Luego agregamos a cada tubo 3 ml de solución de almidón 2%, y mezclamos suavemente, volver a incubar por 10 min a la temperatura correspondiente anteriormente a cada tubo.
Al pasar los 10 minutos añadimos 500 µl de Lugol a cada tubo para realizar la lectura de la absorbancia en el espectrofotómetro a 590 nm y determinar la concentración de almidón de cada uno y con los datos construimos la curva de calibración para evaluar la influencia que ejerce el cambio de temperatura.
A cada tubo se agregó 500 µl de Lugol, excepto al 6, y las cantidades de almidón dadas a continuación en la tabla. Además del agua y la concentración de proteínas que se muestran a continuación
Una vez hecho el procedimiento se realizó la lectura de la absorbancia en el espectrofotómetro a 590 nm. para determinar la concentración de almidón en cada tubo.
B) Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática
Se enumeraron 4 tubos de ensayo.
En un vaso se juntó 10 ml de saliva aproximadamente, para luego introducir 1 ml en los tubos de ensayo, cada tubo se llevó a incubar a distintas temperaturas: tubo 1 a 0° grados, tubo 2 temperatura ambiente, Tubo 3 a 37° grados, Tubo 4 a 90° grados.
Luego a cada tubo se agregó 3 ml de solución de almidón 2%.
Se agito la solución suavemente y cada tubo se llevó a incubar a la temperatura determinada anteriormente por 10 minutos
Pasado el tiempo se agregó a cada reacción 500 µl de Lugol.
Finalmente se realizo la lectura de la absorbancia en el espectrofotómetro a 590 nm. para determinar la concentración de almidón en cada tubo.
CÁLCULOS
Tubo
Almidón 2% (µl)
Concentración %
Absorbancia 590 nm
1
0
0,00
0,0
2
250
0,222
3
1250
0,50
0,317
4
2500
1,00
0,533
5
3750
1,50
0,848
Ecuación obtenida por el gráfico
Y=0,4494x + 0,1317
R2= 0,9667
Experimento 1: Cálculos concentración de almidón
Tubo N° 1:
Y = 0,4494x
= x[pic 4]
X = 1,5331
El tubo N° 1 tuvo una concentración de 1,5331 de almidón
Tubo N° 2:
Y= 0,4759x
= x[pic 5]
X = 1,3284
El tubo N°2 tuvo una concentración de 1,3284 de almidón.
Experimento 2: Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática
Con los datos obtenidos se calcula la concentración de almidón de cada tubo.
Tubo N° 1:
Y = 0,4497x
= x[pic 6]
X = 1,5788
El tubo 1 tuvo una concentración de 1,5788 de almidón
Tubo N° 2:
Y= 0,4497x
= x[pic 7]
X= 1,4743
El tubo 2 tuvo una concentración de 1,4743 de almidón.
Tubo N° 3
Y= 0,4497x
= x[pic 8]
X= 1,2052
El tubo 3 tuvo una concentración de 1,2052 de almidón
Tubo N°4
Y= 0,4497x
= x[pic 9]
X= 0,8739
El tubo 4 tuvo una concentración de 0,8739 de almidón.
RESULTADO
A Cada tubo se le agrega 500 µl de lugol y después se completa hasta alcanzar 5 ml con agua destilada, y además se realiza un tubo “blanco”.
Tubo
Almidón 2% (µl)
Concentración %
Absorbancia 590 nm
1
0
0,00
0,0
2
250
0,222
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