TEMA: Informe práctico biologia celular vegetal.

...

Prueba de Lugol

Almidón (tubo 1)

Sacarosa (tubo 3)

Glucosa (tubo 5)

Color inicial

café oscuro, casi negro

amarillo

amarillo

Color final

Café oscuro, casi negro

amarillo

Amarillo

Prueba de Benedict

Almidón (tubo 2)

Sacarosa (tubo 4)

Glucosa (tubo 6)

Color inicial

Celeste

celeste

celeste

Color final

celeste oscuro

celeste oscuro

rojo ladrillo

Tabla I: coloración de las muestras una vez aplicados lugol y benedict.

[pic 2][pic 3]

En este primer experimento se logra determinar que el lugol es específico del almidón, debido a que este toma la coloración oscura al dar positivo con el reactivo. Por otro lado al estudiar lo ocurrido con el bendict la glucosa fue el único carbohidrato que se puso rojo una vez aplicado calor, así que de todas las muestras solo éste era azúcar reductor.

II.- Observación microscópica:

Una vez lista la preparación para observar al microscopio, se puede determinar la presencia de almidón en la papa, ya que se notan los colores de tipo morado intenso debido a la presencia de lugol (disolución de yodo y yoduro potásico) en su estructura (imagen 2), debido a que el yodo presente es este se introduce en las espiras de la molécula de almidón, por lo tanto, se puede determinar que esta no es una reacción química sino más bien es una reacción física de su estructura6.

[pic 4][pic 5][pic 6][pic 7]

Imagen 2: Papa + lugol observada al microscopio.

b) Identificación de Lípidos

1er tubo: a este se le agregan unas cuantas gotas de sudán, se agita e inmediatamente se puede observar como el agua queda separada del aceite, a los 5 minutos de reposo, se observan dos capas en el tubo, en una de ellas se ve como el sudán queda completamente en la superficie de la mezcla junto al aceite tomando un color rojo y como queda el agua destilada debajo, completamente transparente.

[pic 8]

Imagen 3: Agua destilada + aceite + sudán

2do Tubo: Al agregar a la mezcla ya preparada en el tubo unas gotas de lugol y se agitar, puede observarse como el lugol no hace diferencia entre agua y lípidos, ya que solo se nota una fase.

[pic 9]

Imagen 4: Agua destilada + aceite + lugol

c) Identificación de Proteínas

[pic 10][pic 11]

Imagen 5: Solución de albúmina + biuret (izquierda) v/s almidón + biuret (derecha).

Tras la aplicación de biuret en ambos tubos, se observa que solo el que tiene muestra de albúmina (proteína), se tiñe de color púrpura, el cual es el color específico que toma cuando da positivo, en cambio en la muestra de almidón la muestra se colorea ligeramente celeste, únicamente por el color del reactivo utilizado.

d) Desnaturalización de proteínas

La albúmina es una solución transparente de aspecto opaco, una vez aplicado calor permanece siendo transparente, luego al añadir biuret, la muestra se torna de color púrpura, por tanto da positivo el reconocimiento y a pesar de la exposición al calor, la albúmina se mantuvo como proteína.

Conclusión

Con respecto a los carbohidratos estudiados en el laboratorio, se verifica que el lugol es específico para el almidón, ya que solo en la solución de éste, la coloración cambió a la esperada, mientras que las otras dos muestras de glúcidos tomaron el color del reactivo.

La aplicación de benedict, solo tiene efecto cuando se aplica calor a la muestra, debido a que con temperatura ambiente, todas las soluciones permanecen con el mismo color (celeste), pero una vez puestos los tubos sobre el mechero, se logra determinar que azúcar es reductor, pues solo el carbohidrato que presenta esta característica se tiñe rojo (glucosa).

Después de realizadas las pruebas en los lípidos, es posible declarar que el sudán tiene una mejor eficiencia para reconocer estas biomoléculas, debido a que este reactivo, por su baja polaridad y alto grado se solubilidad en lípidos. Ello gracias a las interacciones intermoleculares de tipo puente H y de London (cadena hidrocarbonada) entre los lípidos y dicho reactivo7.

La temperatura no afecta la conformación primaria de una proteína, por tanto al aplicar gotas de biuret a la albúmina, la solución se colorea púrpura, lo que corrobora que en la muestra hay existencia de proteínas, por tanto se puede concluir que la desnaturalización es un proceso reversible, ya que es la estructura primaria la que contiene la información necesaria y suficiente para adoptar niveles superiores de estructuración8, por tanto la desnaturalización no implica que la proteína se desarme 100%, convirtiéndose en aminoácidos libres, sino que se mantiene la estructura elemental y puede ser reconocida por este test específico de proteínas.

Referencias Bibliográficas

- Articleworld, 2007. Biomoléculas. GreenFacts. http://ec.europa.eu/health/scientific_committees/opinions_layman/es/glosario/abc/biomolecula.htm (Consultado: 2 de Abril de 2016)

- Q-Blog, 2014. ¿Por qué el lugol tiñe el almidón?. Quimitube. http://www.quimitube.com/como-se-detecta-almidon-muestra-de-alimento (Consultado: 2 de Abril de 2016)

- M.P Vallejo, 2013. Azúcar reductor

...