INTRODUCCION A LABORATORIO CLINICO

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Idealmente la muestra debería separarse en tres partes de 5ml a 10 ml dentro de un tubo o jeringuilla estéril hepanirizada para estudios microbiológicos; de 2ml a 5 ml en un tubo anti coagulado (heparina sódica o liquido EDTA) para examen microscópico; y cerca de 5 ml dentro de un tubo normal (sin anticoagulante) que permita su coagulación (el LS normal no se coagula). Las concentraciones de heparina superiores a 125 U/mm tienen un efecto inhibidor en algunas bacterias patógenas (Rosett 1980). Las muestras para cultivo deberían por tanto tener al menos 1 ml a 2 ml si se envían -en tubos de heparina con tapón verde (Becton Dickinson, Rutherford, NJ), conteniendo 143 U por tubo de heparina, o ser enviadas en jeringuilla tapadas tras haber retirado la aguja y exceso de aire.

Las “punciones en seco” pueden tener líquido dentro de la aguja, y puede ser suficiente para análisis más críticos. Estas muestras deberían enviarse con la aguja unida a la jeringuilla, y su punta clavada en un corcho estéril. La buena comunicación con el laboratorio es crucial para el procesamiento adecuado de estas muestras.

Pruebas Recomendadas

El diagnostico de artritis infecciosa y de cristales del líquido sinovial son razones más imperiosas para el análisis del LS. Los análisis habituales, por tanto, están dirigidos al diagnóstico de estas alteraciones. Es vital que estén bien realizados porque pueden proporcionar información diagnostica altamente especifica. Una técnica de calidad, desafortunadamente, no es constante (Rabinovith, 1994). Otros análisis no tienen valor practico para su uso habitual, pero pueden proporcionar una información diagnostica en ciertas circunstancias.

Examen Macroscópico

El volumen total debería detallarse en el momento de la extracción, especialmente si la muestra se va a enviar a diferentes secciones del laboratorio.

El color se evalúa en un tubo de cristal transparente sobre un fondo blanco. El LS normal es realmente incoloro pero a menudo es amarillo pálido debido a la diapédesis de algunos RBC asociada incluso con un pequeño traumatismo. Los trastornos inflamatorios y no inflamatorios tienen habitualmente un color pajizo a amarillo (xantocromía). El líquido séptico puede ser amarillo, marrón o verde dependiendo de los cromógenos producido por el organismo involucrado y la respuesta del huésped, e incluyen WBC yRBC.

La punción traumática produce una distribución desigual de sangre durante la artrocentesis o líneas en la jeringuilla. Aunque la xantocromía amarilla pálida es difícil de distinguir de la normal, un color rojo-marrón tras la centrifugación es una buena evidencia de hemartrosis patológica.

La claridad se relaciona con el número y tipo de partículas dentro del líquido sinovial. Habitualmente el LS es transparente; fácilmente se puede leer un papel a través del tubo. El líquido traslucido eclipsa detalles pero las áreas blancas y negras pueden distinguirse, mientras que el líquido opaco oscurece completamente el fondo.

Los leucocitos son los responsables más habituales de los cambios en la claridad, pero un número masivo de cristales puede producir un líquido opaco, lechoso opalescente sin células blancas. Una muestra poco resplandeciente de apariencia oleosa, sugiere la abundancia de cristales de colesterol, que puede parecer como pus.

La elevada turbiedad es menos frecuente debido a la concentración de fibrina “partículas de arroz” flotando libres (fragmentos de células proliferativas degeneradas o de membrana sinovial microinfartada), partículas de plástico o metal de pacientes con prótesis articulares o fragmentos de cartílago en la artrosis. Un aspecto en “pimienta en grano” por los fragmentos. De cartílago pigmentario es un signo de ocronosis.

Examen Microscópico

Recuento celular total debería realizarse inmediatamente para evitar la pérdida celular degenerativa, que empieza tan pronto como una hora después de la artrocentesis. Los tubos deben estar invertidos antes de introducir la muestra para asegurar una muestra uniforme. Los recuentos habitualmente se realizan en un hematocitometro estándar. Pueden utilizarse contadores celulares automatizados, pero existe riesgo de obstruir la apertura de la maquina o de obtener recuentos celulares falsamente elevados de partículas que no son WBC (cristales y glóbulos adiposos), especialmente las maquina multicanal. Un portaobjetos con una preparación húmeda y recuento de 0 a 2 leucocitos por campo de alta intensidad (hpf) (media por encima 10 campos) predice menos de 1.300 WBC por recuento celular (Clayburne, 1992).

El recuento leucocitario por encima de 50.000/ul requiere dilución, que debería realizarse con salino, no con ácido acético, para evitar la formación de coágulos de mucina y aglomeraciones celulares.

El LS altamente viscoso debería incubarse con hialuronidasa antes de su recuento, especialmente si se utilizan contadores automatizados. Se deberían encontrar los hematíes a menos que se haya producido una clara puncion traumatica. Si un elevado numero de hematíes interfiere con el recuento de WBS, pueden lisarse por dilución con suero salino fisiológico 0,3 N,o 0,1 CIH, saponina al 1% en salino.

EL límite superior del normal para los leucocitos en LS en las muestras clínicas es de 150/ul a 200/ul (Kjeldesberg, 1993). Los recuentos celulares elevados se usan para permitir realizar diferentes categorías de enfermedades según los hallazgos (véase mas adelante corre clínica) pero no son específicos para ninguna enfermedad particular debido a su gran solapamiento.

Recuento Diferencial

Se prefieren las preparaciones de citospina al frotis de LS centrifugado por la mejor morfología celular. Puede ser necesario el tratamiento con hialuronidasa para producir frotis finos en las muestras viscosas. El grupo I de artropatías (no inflamatorias) raramente necesitan de un recuento diferencial.

Los neutrófilos habitualmente representan alrededor del 20% de los leucocitos del LS. Utilizando el 75% como punto de corte, la sensibilidad de un proceso inflamatorio es del 75% y la especificidad del 92% (Shmelinng, 1990). La gota por uroatosy la artritis reumatoide (AR) pueden también tener altos porcentajes. Los neutrófilos frecuentemente exhiben cam, y pueden contener bacterias, cristales, gotas de lípidos, vacuolas o inclusiones azul oscuras (ragocitos, célula AR).

Los linfocitos habitualmente representan el 15% del diferencial, y hay muchos en la AR precoz, infecciones crónicas