Ingeniería Bioquímica. ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD

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- Prevenir la infección de personas, animales y plantas.

- Evitar la interferencia por microorganismos contaminantes, en los procesos que dependen de los cultivos puros.

- Para prevenir la contaminación de materiales usados en el trabajo en cultivo puro en el laboratorio de modo que el estudio de una clase determinada de microorganismos en un medio particular o en un animal infectado, no pueden confundirse por la presencia y desarrollo de otras especies

Esterilización por Agentes físicos Utilizados en la práctica

Calor seco

- Flameado: Es un procedimiento simple y eficaz, consiste en la exposición de un objeto a efecto de la llama hasta la incandescencia. Se esteriliza de esta forma, por ejemplo: asas de cultivo de siembra.

- Incineración: Es el mejor sistema para esterilizar todos aquellos productos en los que no importe destrucción, por ejemplo: material biológico.

- Estufa: Calor seco a alta temperatura, 20 minutos durante 180°C, 60 minutos a 160°C, siendo suficiente para la esterilización durante 60 minutos a 100-140°C, se le utiliza para esterilizar material de vidrio debidamente envuelto en papel, metal, etc.

Calor húmedo

La esterilización con calor húmedo (vapor de agua) es mucho más rápida y eficaz que el calor seco debido a que las moléculas de agua desnaturalizan las proteínas de forma irreversible mediante rotura de los uniones H entre los grupos peptídicos a temperaturas relativamente bajas.

- Autoclave: Horno a presión, consiste en una cámara en la que el aire puede ser sustituido por vapor de agua sometida a presión. Se opera a 121°C a 1 atm. De presión durante 20 minutos. De esta forma se consigue destruir todas las formas vegetativas y esporas. Se lo utiliza para esterilizar todo material resistente a esa temperatura y es muy utilizado para la esterilización de medios de cultivo.

Esterilización y desinfección por agentes químicos utilizados en la práctica

Los agentes químicos reaccionan con gran facilidad con diferentes grupos funcionales de los ácidos nucleicos y proteínas alquilando estos radicales esenciales.

- Alkazyme: Es una solución que se utiliza al 0.5 % como limpiador y descontaminante de instrumental antes de ser esterilizado.

- Alcohol: Actúa desnaturalizando proteínas. Su acción es rápida, pero se evaporan con facilidad. El alcohol etílico se utiliza en antisepsia a una concentración de 70%, a esta concentración se reduce más la tensión superficial de la célula bacteriana facilitando el proceso de desnaturalización.

- Cloro: utilizado solo o en forma de hipoclorito sódico, actúa como un potente desinfectante. Añadido al agua destruye rápidamente las bacterias y otros microbios que pueda contener.

Tasa de muerte microbiana

Cuando una población bacteriana es tratada con químicos o con calor, usualmente éstas mueren a una tasa constante. Por ejemplo, si suponemos que tenemos una población de 2 millones de microorganismos que han sido tratados por un minuto, y 90 % de la población ha muerto. Ahora nos quedan con 200,000 microorganismos. Si la población es tratada por otro minuto, 90 % del remanente de la población será exterminada, resultando en 20,000 microrganismos. Si la curva de mortandad es trazada logarítmicamente, la tasa de muerte es constante.

Factores que influyen en la efectividad de los tratamientos antimicrobianos

- El número de microorganismos: A mayor número de microorganismos que se tengan al inicio, mayor tiempo para eliminar la población entera.

- Influencias ambientales: La presencia de materia orgánica regularmente inhibe la acción de antimicrobianos químicos. Microorganismos localizados en biopelículas, son difíciles de matar por biocidas, porque la actividad de éste es dependiente de la temperatura de la reacción química; los desinfectantes funcionan un poco mejor bajo temperaturas altas.

- Tiempo de exposición: Los químicos antimicrobianos suelen requerir un mayor tiempo de exposición para microorganismos más resistentes o endoesporas, esto con el fin de que sea efectivo.

- Características microbianas: Dependiendo las características del microorganismo se van a tener que usar diferentes métodos para poder eliminarlo.

Acciones de los agentes antimicrobianos

Alteración de la permeabilidad de la membrana: La membrana plasmática de los microorganismos, localizada en la pared celular, es el objetivo de muchos agentes antimicrobianos. Esta membrana regula activamente el paso de nutrientes a la célula y la eliminación de desechos de la misma. El daño a los lípidos o proteínas de la membrana plasmática por agentes antimicrobianos causa que el contenido celular salga al medio y esto interfiere con el crecimiento de la célula.

Daño a las proteínas y ácidos nucleicos: Para que una proteína sea funcional se necesita que se encuentre en su estructura terciaria por lo menos, ésta se encuentra constituida por puentes de hidrógeno los cuales son susceptibles a romperse con calor o ciertos químicos; la rotura de estos puentes nos da como resultado la desnaturalización de la proteína. Del mismo los enlaces covalente aunque son más resistentes también son objetivos de agentes antimicrobianos.

Los ácidos nucleicos ADN y ARN son los que llevan la información genética de la célula. El daño a estos por calor, radiación, o químicos es frecuentemente letal para la célula. La célula no se puede replicar y tampoco puede tener sus funciones metabólicas normales como la síntesis de enzimas. Las altas temperaturas a las que funcionan las autoclaves eliminan todo tipo de microbios y bacterias, incluyendo las esporas.

Metodologia aplicada para los laboratorios

Nuestro trabajo se basa en una metodología para el control de los laboratorios de nuestra area en el ITTEPIC se sabe que no contamos con el personal necesario por lo que se requiere a 2 personas para dicha metodología.

Entrega de material:

Utilizando una herramienta de calidad se hara un cronograma de actividades por dia de la utilización de los laboratorios, estipulando en dicho cronograma día, duración de la practica, hora de la practica, si abra