MEDICIÓN DE pH y SISTEMA BUFFER.

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En casos donde se necesite agitación magnética, no agitar a gran velocidad ni con movimientos excéntricos de la barra magnética para evitar que esta pueda golpear y romper el electrodo.

1. Medidas de pH.

1. Utilizar dos series de 3 tubos numerados como 1A, 2A, 3A, y 1B, 2B, 3B.

2. A la serie A añadir 10 ml de agua destilada a cada tubo y a la serie B 10 ml de tampón fosfato.

3. Adicionar con una pipeta pasteur 3 gotas de HCl 0,5M a los tubos 2A-2B y 3 gotas de disolución de NaOH 0,5M a los tubos 3A-3B.

4. Siempre lavar bien las pipetas si se van a utilizar para más de un reactivo.

5. Medir los pH de todos los tubos y calcular las variaciones producidas por la adición de un ácido o una base fuertes sobre las tres soluciones.

6. Determinar el pH de las soluciones de la parte A utilizando el electrodo.

2. Efecto de un antiácido sobre el pH estomacal

Reactivos

Ácido Acético 0.1 N

Ácido Clorhídrico 0.1 N

Para preparar 100 ml. Tomar 40 ml de ácido acético y agregarle 15 ml de ácido clorhídrico y completar a 100 ml con agua destilada.

Lugol

Ptialina o amilasa salival (saliva)

Prepara el patrón y el blanco

Tomar 5 ml de solución de almidón y agregarle 5 gotas de lugol. Anotar los cambios observados.

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Tomar 5 ml de agua destilada y agregarle 5 gotas de lugol. Describir lo observado

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Salivar en un beaker pequeño (3 ml aproximadamente)

Tomar 5 ml de solución de almidón y agregarle 1 ml saliva, agitar. Describir los cambios

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Agregarle 5 gotas de lugol. Describir lo observado

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Esperar 15 minutos y describir lo observado

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Desarrolle el mismo procedimiento, pero ahora adicione 1 ml de solución de HCl 0,5 M a la solución de almidón y luego adicione 1 ml de saliva

Espere 15 minutos, observe y describa

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Si no se produjeron cambios, agregar 1 ml de solución de NaOH 0,5 M deje actuar 15 minutos, observe y describa

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Desarrolle el mismo procedimiento anterior, pero en lugar de agregar NaOH, adicione 2 ml de un antiácido. Si no nota cambios, siga adicionando antiácido hasta que la reacción para almidón de negativa.

Cuál es el blanco y porqué

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Calcule la cantidad de antiácido adicionado hasta que la reacción para almidón dio negativa y comparar con la cantidad de NaOH adicionada.

5. PREGUNTAS COMPLEMENTERIAS

1. Calcule teóricamente el pH resultante de las experiencias descritas en el apartado 2 y compare con los resultados experimentales.

2. En que rango de pH considera que es efectivo un sistema amortiguado: cerca de su pK o en cualquier rango? Explique por qué?

3. Porqué el sistema bicarbonato en el plasma se expresa como bicarbonato /CO2.

4. En el principal sistema regulador del pH sanguíneo, bicarbonato/carbónico tiene características especiales que hacen que no sea un buen sistema amortiguador “in vitro” ¿Cuáles son?

5. Conoce algún aminoácido proteico que tenga un buen poder amortiguador a pH próximo a la neutralidad? Cítelo.

6. De qué manera, la hemoglobina (Hb) regula o amortigua el pH sanguíneo

[pic 2]

Figura5.1. Prueba para determinar