PRÁCTICA #3 CONTROL DE LA FRECUENCIA CARDIACA EN VERTEBRADOS

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Durante la práctica se estudió el efecto de diversos factores exógenos y endógenos sobre la regulación de la frecuencia cardíaca, además de observar la existencia de regiones marcapasos e identificar los componentes de un latido cardíaco, registrando los resultados empleando como instrumento el Kimógrafo.

OBJETIVOS

- Identificar mediante registro en el Kimógrafo, las contracciones correspondientes a las aurículas, ventrículo y seno venoso.

- Medir la frecuencia cardíaca mediante utilizando el instrumento antes mencionado.

- Analizar los efectos de agentes neurotransmisores (acetilcolina) sobre la frecuencia cardíaca.

- Demostrar la mediación de receptores en el caso de la acetilcolina, bloqueando los mismos con atropina.

- Estudiar el efecto de la adrenalina sobre el músculo cardíaco.

- Estudiar el efecto de la variación de temperatura como un factor externo (exógeno).

- Estudiar la modificación que sufre la actividad del marcapaso natural por efecto de una estimulación eléctrica.

- Demostrar la existencia y localización de las regiones marcapasos (Ligaduras de Stannius).

MATERIALES

• Aguja de disección • Alfileres • Pinza dentada • Tijera barrilito • Tijera • Pinzas grandes rectas • Pinzas sin dientes • Pinzas para fijar el corazón al Kimógrafo • Papel ahumado para el registro en el kimógrafo • Pajuela • Pila• Solución Ringer (frio, caliente, temperatura ambiente) • Acetilcolina• Atropina.

NOTA: no se realizaron experimentos con adrenalina.

METODOLOGÍA

1.-PREPARACION DE LA MUESTRA

Se desmeduló y descerebró el sapo con una aguja de disección y se fijó con alfileres a la tabla exponiendo la zona ventral para realizar la disección. Se retiró la piel desde la zona caudal hasta la región de la garganta para descubrir la musculatura de la zona ventral. Se realizó un corte similar desde el esternón hasta las clavículas y se alcanzó la cavidad del corazón.

NOTA: Desde la exposición del corazón hasta el final de la práctica se mantuvo la zona hidratada con Ringer cada 1-2 minutos.

2.- MONTAJE DEL EXPERIMENTO

Se levantó el corazón desde abajo con una pinza cerrada y se fijaron las pinzas especiales en la zona apical del ventrículo al kimógrafo, evitando tocar alguna otra estructura del corazón. En la Figura A se observa el montaje experimental.

[pic 3][pic 4]

Figura A. Montaje experimental.

3.- PARTE EXPERIMENTAL.

NOTA: Se debe calibrar el kimógrafo antes o después de realizar los experimentos. También se debe ajustar correctamente la pajuela tangencial al tambor y para el registro acercar la punta inscriptora con el ajuste fino. Además, el corazón debe estar levantado hasta que en diástole se tenga la pajuela en posición horizontal y al finalizar cada experimento bajarlo a la posición de reposo, dejándolo descansar 1-2min.

- Componentes Del latido cardiaco. Teniendo la mayor velocidad en el kimógrafo se realizó un registro de los componentes del latido durante 10segundos.

- Registro de la frecuencia normal. Se colocó el corazón en posición de registro y una menor velocidad, se realizó un registro continuo durante 60s obteniendo una frecuencia promedio de latidos y su cambio en el tiempo.

NOTA: Para los siguientes experimentos se utilizó una velocidad menor y durante 15s se registró la frecuencia cardíaca sin tratamiento como control de cada experimento.

- Efecto de la Acetilcolina (ACh). Se registró la frecuencia 15s como control, posteriormente se colocaron 3 gotas aproximadamente de Ach sobre el SV y se registró durante 10min. Durante el ensayo no se agregó ringer, ya que esto habría contrarrestado el efecto de la Ach

- Efecto de la atropina (Atrp). Se realizó un control de 15s, después se colocaron 5 gotas de Atrp sobre todo el corazón registrando 20s. Seguidamente se aplicaron 3 gotas de Ach sobre el SV y se registró durante 5min para observar el efecto inhibitorio de la Atrp. No se agregó ringer durante el experimento.

- Efecto de la temperatura. Se agregó un goteo continuo de ringer frio sobre todo el corazón durante 30s, se registró hasta los 60s. Se realizó otro control 15s con ringer temperatura ambiente y para el ringer caliente se siguió el procedimiento anterior.

NOTA: Los siguientes experimentos se realizaron sin registro en el kimógrafo, se cronometraron las respuestas obtenidas.

- Efecto de la Estimulación Eléctrica. Se midió la frecuencia de los latidos de SV, A y V, observando si existía o no alguna arritmia. Se colocó el electrodo de estimulación sobre el SV y se estimuló por 20s, tiempo en el cual se midió la frecuencia en cada parte del corazón.

- Demostración de la existencia de marcapasos. Se colocó con hilo un lazo que separaba el SV de la A y otro entre la A y el V. Se registró la frecuencia en cada parte del corazón antes de realizar los amarres. Se cerró el amarre del SV y se midió el tiempo hasta que comenzara a latir resto del corazón, luego se midieron las frecuencias en cada componente de este. Se realizó el mismo procedimiento cerrando el lazo que separaba A de V, midiendo el tiempo desde que realizó el amarre hasta que comenzaba a contraerse V. Se agregó ringer durante el experimento.

RESULTADOS

Se calibró el kimógrafo a cada velocidad a utilizar en la parte experimental del trabajo y se encontró que las velocidades registradas eran aproximadamente el doble que las indicadas en el instrumento, como expresa la tabla 1.

Tabla 1. Calibración del kimógrafo empleado para los registros del latido cardíaco.

Velocidad kimógrafo (mm/min)

Velocidad obtenida (mm/min)

64

128

128

256