Procedimiento para realizar cromatografía en capa fina

...

Primeramente la maceración del chile pasilla se concentró con ayuda de un rota vapor y después se procedió a preparar la columna. Se utilizó una bureta de 25 mL, en ella se colocó un disco de algodón en el fondo y después se agregó un poco de sal hasta conseguir una altura de aproximadamente 1 cm, a continuación se preparó una suspensión de la sílice gel para columna con tolueno y se procedió a empaquetar la columna agregando esta suspensión a la bureta hasta haber conseguido una altura de aproximadamente 10 cm, seguido del adsorbente se agregó un poco más de sal, de igual manera 1 cm de altura.

A continuación se aplicó la muestra del chile pasilla a la columna y en seguida se agregó 5 mL de tolueno y se observó la separación de los colores amarillo, anaranjado, rojo y verde, en la parte superior de la columna se quedaron unas tonalidades muy oscuras, así que se agregó una solución 10% acetona y 90% tolueno, y así se continuo la separación por gradientes:

- 20% Acetona 80% Tolueno

- 40% Acetona 60% Tolueno

- 50% Acetona 50% Tolueno

- 70% Acetona 30% Tolueno

- 100% Acetona

Cuando finalmente se colectó el eludido y consideró una separación completa, se procedió a realizar una cromatografía en columna para valorar la separación realizada en columna.

Primero se prepararon las placas cromatografías y en cada una de las placas se aplicaron 3 muestras de los diferentes eludidos colectados. A continuación se introdujeron las placas en las cámaras de elución, las cuales contenían una disolución 10% acetona y 90% tolueno.

Resultados[pic 2]

[pic 3]

[pic 4]

[pic 5]

[pic 6]

Muestra

Rf

Resultado

1

5.5cm/6.3cm

0.8730

2

5.5cm/6.3cm

0.8730

3

5.5cm/6.3cm

0.8730

4

5.6cm/6.5cm

0.8615

5

5.6cm/6.5cm

0.8615

6

5.6cm/6.5cm

0.8615

7

5.5cm/6.3cm

0.8730

8

4.5cm/6.3cm

0.7142

9

4.2cm/6.3cm

0.6666

10

3cm/3.5cm

0.8571

11

2.5cm/3.5cm

0.7142

12

2.2cm/3.5cm

0.6285