Producción Natural

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Los 23 experimentos factoriales se eligieron para examinar la condición óptima de polvo de maíz hidrolizado por alfa-amilasa y glucoamilasa (Tabla 1). Los factores tliree fueron dosificación de alfa-amilasa (A), dosis de glu-coamilasa (B) y tiempo de reacción (C). Las levillas eran 0,005 g (-). O.OlOg (+) para A; (-), 0,200 g (+) para B y 1 h (-), 2h (+) para C.

La solución tampón se preparó con 0,2 N de fosfato de hidrógeno dipotaso (103,00 ml) y 0,1 N de ácido cítrico (97,00 ml). Con precisión 5.000 g de polvo de maíz. Se mezclaron 10,00 ml de solución tampón y agua destilada y el polvo de maíz se hidrolizó por alfa-amilasa y glucoamilasa a 60 ° C y pH 6,0.

2.3. Cultivo

Se inoculó Chlorella protothecoides en periodo exponencial (10%, v / v) en un medio líquido. El cultivo heterotrófico de C. protothecoides se llevó a cabo inicialmente en una lente Erlenmeyer de 500 ml que contenıa 300 ml de medio a 28 ± 1 ◦ C bajo agitación continua (180 rpm) y aire que fluıa en la oscuridad (Miao y Wu, 2004a). Se llevó a cabo un cultivo heterotrófico adicional en un fermentador de 5 l (Biostat Q, B.BRAUN, Alemania) que contenía medio de 3,0 l, en el que la solución de glucosa concentrada se alimentó por lotes. La concentración de oxígeno disuelto se controló aumentando la velocidad de agitación y el flujo de aire. La velocidad de aireación y la velocidad de agitación fueron variables y ajustadas inicialmente a 0,5 vvm y 300 rpin. La temperatura se controló 28 ± 1ºC.