Que son las Enzimas y cules son sus funciones

...

7. Contesta lo que se te pregunta sobre la siguiente figura:

Respecto a los estándares de peso molecular, ¿cuál es la banda de alto peso molecular y cual la de bajo peso molecular? De acuerdo a lo que sabes de electroforesis el pI de la proteína purificada estará por arriba o por debajo de 8.9.

Calcula el peso molecular de la banda purificada.

[pic 1]

8. Si una proteína es colocada en un pH arriba de su punto isoeléctrico se encuentra con una carga:

A. Neutra B. Positiva C. Negativa D. No influye en la proteína

9. Un científico trabajando con un sistema de fermentación observo un tipo de inhibición de su enzima al convertir el sustrato en producto. El observo con cuidado las gráficas que se le produjeron en condiciones estándar e inhibidas (ver Figura). Responde lo siguiente y resuelve el misterio.

a. ¿Qué tipo de gráfico se está representando?

Michaelis-Menten B) Dobles recíprocos C) Hanes

D) Sigmoide

b. ¿Cuál de las dos curvas representa el efecto del

inhibidor sobre la actividad de la enzima?

La curva A B) La curva B C) Ambas curvas

D) Ninguna

c. El inhibidor presente en el fermentador produce una inhibición de tipo:

A) Irreversible B) Competitivo C) No competitivo D) Mixto

d. ¿Cuál es el efecto del inhibidor sobre la Vmax de la reacción?

A) Incrementarla B) Disminuirla C) Ninguno D) Datos insuficientes

d. ¿Cuál es el efecto del inhibidor sobre la Km de la reacción?

A) Incrementarla B) Disminuirla C) Ninguno D) Datos insuficientes

E. ¿Cómo puede el investigador resolver su problema de inhibición en su fermentador?

A) Disminuyendo la concentración de sustrato

B) Manteniendo la concentración de sustrato

C) Incrementando la concentración de sustrato

D) Datos insuficientes

[pic 2]

Característica

Método

Lowry

Bradford

A280 ηm

Aminoácidos o enlaces que reconoce

Residuos de tirosina

Arginina, fenilalanina, triptofano y prolina.

Absorción de tirosina y triptófano

Sensibilidad

10-1000 ug/ml

Libre se detecta a 470 nm mientras que la forma unida a proteínas a 595 nm

20-2000 ug/ml

0.1-100 ug/ml

Compuestos que interfieren

Incompatible con detergentes y agentes reductores, procedimiento largo

Incompatible con detergentes

Incompatible con detergentes y agentes desnaturalizantes, alta variabilidad

Destruye la muestra

Compuesto empleado para la detección de la proteína

Reducción de cobre por proteínas, reducción de Folin Ciocalteu por el complejo de cobre con proteína

Colorante el Coomassie ® Brilliant Blue

Absorción UV

Otra características que consideres y que no haya contemplado

Es un método colorimétrico de valoración cuantitativa de las proteínas

alta sensibilidad y precisión

Bradford es un ensayo colorimético para la medición de proteína total en una solución dada.

Pequeño volumen de muestra, rápido, económico