REACCIONES DE AMINOÁCIDOS Y PROTEÍNAS

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Reacción de Hopkins-Cole.

Es una reacción característica del anillo indol y por lo tanto del triptófano, que es el único aminoácido que contiene este grupo. El ácido glioxílico reacciona con el anillo indol y en medio fuertemente ácido se puede observar la producción de un compuesto colorido violeta-rojizo que se presenta en forma de anillo. Debido a lo anterior, la solución de triptófano utilizado resultó positiva, al igual que la peptona y la albúmina. Lo anterior indica que la peptona empleada es un hidrolizado de proteínas que poseen triptófano en su estructura. La albúmina es una proteína que posee triptófano, lo cual explica la aparición del anillo violeta. La fenilalanina resultó negativa pues no posee anillo indol. La gelatina no contiene el aminoácido triptófano, debido a esto no se llevó a cabo la reacción.

Reacción de Biuret

Como resultado positivo tenemos a la gelatina, peptona y albúmina que, de acuerdo a la teoría y lo experimentado, contienen más de 3 enlaces peptídicos, pues se conforman de una variedad de aminoácidos unidos entre sí mediante enlaces peptídicos. Todos los péptidos no menores de 3 unidades dan positiva esta reacción, es por esto que los aminoácidos empleados, resultaron negativo a la prueba y presentaron color azul, que es el color del reactivo.

La reacción (que debe llevarse en medio alcalino) se basa en la formación de un compuesto de color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forman parte de los enlaces peptídicos.

Esta reacción nos sirve para diferenciar las proteínas y péptidos (no menores de 3 aminoácidos) de los aminoácidos. La reacción será negativa cuando la hidrólisis sea completa.

Reacción de plomo para grupos SH (cisteína). La albúmina resultó positiva para esta reacción, al igual que la cisteína. La albúmina (aunque no se especifica si es de huevo, leche o de suero humano) contiene gran cantidad de cisteína, un aminoácido que posee a su vez el grupo SH, esto explica la intensidad del color negro que se presentó en el tubo al llevar a cabo la reacción, ya que el acetato de plomo en medio alcalino, reacciona con dichos grupos sulfhidrilo, uniéndose a éstos y produciendo un precipitado color negro. Por otra parte, la gelatina y la peptona resultaron negativas para esta prueba; la gelatina contiene diversos aminoácidos, en su mayoría glicina, alanina, prolina e hidroxiprolina, pero no contiene cisteína, lo cual explica la falta de precipitado negro. La peptona, es un hidrolizado de proteínas que pueden ser de origen animal o vegetal, por lo que conocer su composición en aminoácidos es difícil, pues depende del tipo de proteínas hidrolizadas que la conforman, sin embargo, el resultado negativo en esta reacción nos permite deducir que la peptona utilizada no contiene cisteína.

CONCLUSIONES.

-Las proteínas están formadas por aminoácidos, unidos por enlaces peptídicos y aunque presentan propiedades fisicoquímicas y biológicas características éstas son reflejo de los aminoácidos que las constituyen. -Muchas de las reacciones coloridas que se utilizan para el análisis de las proteínas se deben a las cadenas laterales específicas de cada aminoácido. -La reacción de plomo es positiva sólo para cisteína por ser el único aminoácido con grupo –SH. -La reacción de la ninhidrina identifica la presencia de grupos amino libres (amino primarios). -La reacción de Hopkins-Cole es específica para el anillo indol.

-La reacción Xantoproteíca es positiva sólo para aminoácidos aromáticos activados como el triptófano y tirosina. -La reacción del Biuret nos permite identificar proteínas y péptidos (constituidos por no menos tres aminoácidos), de aminoácidos.

-La reacción de Millon es positiva sólo para tirosina, al ser el único aminoácido que presenta grupo fenólico.

FUENTES DE CONSULTA.

- [Libro electrónico] Ville, C. A.: Proteínas. En: Biología. 6ª Ed. Interamericana, México, 1974. pp. 31-33.

- Orten, M. J: Líquidos Orgánicos. En: Bioquímica Humana. Ed. Panamericana, Argentina, 1998. pp. 405,407

- Murray, K. R; Granner, K. D: Nutrición. En: Bioquímica de Harper. Ed. Manual Moderno, Mexico DF, 1990. pp. 750