SECCION DE BIOQUÍMICA Y FARMACOLOGÍA HUMANA Toxicologia

...

En los últimos años, el objetivo de muchos laboratorios relacionados con el estudio de productos naturales ha sido desarrollar y utilizar nuevos procedimientos de bioensayos; tratando de fomentar métodos baratos, fáciles de utilizar, reproducibles y obtiener resultados confiables estadísticamente. De esta manera, son detectados y aislados con rapidez compuestos bioactivos novedosos. El objetivo principal de la investigación no es solamente aislar moléculas con estructuras novedosas, sino aislar nuevos compuestos bioactivos que tengan aplicaciones potenciales o puedan servir como compuestos guías para las modificaciones sintéticas.

Un lugar sobresaliente dentro del grupo de bioensayos más utilizados lo ocupa el ensayo de Artemia spp. Este es un ensayo general de amplio uso que determina el efecto letal de los materiales en Artemia spp., y de esta manera se predice su habilidad para producir la muerte y/o ejercer un amplio rango de efectos farmacológicos.

Artemia spp. son camarones minúsculos de cuerpo blando, de color carmelita y transparentes a la luz; pertenecen al Phylum Arthropoda, clase Crustaceae, subclase Branchiopoda. Se conocen comúnmente por el nombre de artemia, también llamados "monos de mar" o "brine shrimp" en inglés. El género Artemia está compuesto por varias especies, de las cuales se han identificado al menos cinco especies bisexuales y varias poblaciones partenogenéticas, entre ellas Artemia salina Leach, Artemia persimilis Piccinelli y Prosdocimi, Artemia franciscana Kellogg (bisexuales) y Artemia partenogenetica Bowen y Sterling.

Artemia es hasta la fecha el único género animal en todo el mundo cuyo estado criptobiótico (quistes) está disponible comercialmente de manera continua, como fuente de alimentos para peces y crustáceos en acuicultura. Esto ha constituido un elemento clave en su utilización en ensayos biológicos. Por razones prácticas, las especies con un estado criptobiótico, durante su ciclo de vida son más adecuadas para el desarrollo de un bioensayo estándar. La disponibilidad permanente de huevos (quistes) a partir de los cuales pueden ser obtenidas las larvas ofrece las siguientes ventajas:

- no hay necesidad de mantener una colonia viva permanentemente.

- Las pruebas pueden realizarse dónde y cuándo sea necesario.

- Se dispone siempre de un número suficiente de individuos de la misma edad y condición fisiológica.

Prueba ecotoxicológica para el ambiente marino. Para la protección del ambiente marino, son necesarios métodos de ensayos ecotoxicológicos simples y confiables para determinar el impacto potencial sobre la biota marina de sustancias xenobióticas (7). Además, la implementación correcta de medidas regulatorias, tanto en el ámbito nacional como internacional, requiere que los métodos toxicológicos usados sean confiables y reproducibles.[pic 3]

Imagen 1.- Se muestra el ciclo biológico de artemia salina (tomado de goo.gl/kXqhhd el 04-10-16 a las 8:05am).

La presente experimentación pretende determinar la CL50 del dicromato de potacio y el peróxido de hidrogeno mediante una exposición de cantidad específica de artemias a estos tóxicos con la finalidad de demostrar su toxicidad al modificar cambios anatómicos y la forma en cómo se desplazan.

Materiales y métodos

[pic 4]

Resultados

Tabla 1.- Resultados de la exposición a H2O2 en diferentes sistemas y concentraciones.

Frasco

Artemias totales

Artemias vivas después de 90min

Artemias muertas después de 90min.

1*

30

30

0

2

30

30

0

3

30

29

1

4

30

30

0

5

30

30

0

6

30

30

0

7

30

29

1

8

30

29

1

*Control negativo

Tabla 2.- Resultados grupales para el H2O2 (0.6%)

Artemias totales n

Vivas a 90min

Muertas a 90min (r)

*

**

-

+

++

1

105

104

1

0.009

0.95

2.67

0

-

2

105

103

2

0.019

1.90

2.95

0.008