Tecnicas de observación BC.

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*Microscopía de Fluorescencia: Posee la propiedad de estimular rayos de luz de cierta longitud de onda para que absorba dicha energía y emitan fotones de mayores longitudes de onda. Para el funcionamiento de la técnica la longitud de onda de la fuente de iluminación utilizada debe coincidir con el pico del espectro de excitación del fluorocromo. Se utilizan muestras con espesor de 10 a 20 micras y un reactivo para aumentar la fluorescencia de la muestra (fluorocromo o fluoresceína). Ha permitido avanzar en la investigación de procesos fisiológicos celulares ya que permite demostrar por la radiación partículas sumamente pequeñas.

*Microscopía Electrónica de Barrido: Sirve para observa la superficie constituida por una serie de diminutas relieves sinusoidales, depresión, grietas y prominencias en estado viviente. Depende de la densidad que posean los componentes del espécimen, se le atraviesan con haces de electrones que son absorbidos, reflejados y son desviados en su recorrido. Contiene un detector de electrones secundario que permite el paso de electrones a la muestra. Las muestras se preparan a través de la técnica del secado hasta el punto crítico en el que se sustituye el solvente de deshidratación por CO2 que aplicándole una determinada presión y temperatura pasa a la fase gaseosa sin pasar por el estado sólido teniendo la superficie intacta de la muestra. Se cubre con una película de metal pesado (Plata, oro, platino o paladio). Informa sobre la ultraestructura de la superficie de la muestra.

*Microscopía Electrónica de Transmisión: Emplea haces de electrones y lentes construidos mediante campos electromagnéticos. Los electrones emitidos bajo ciertas circunstancias pueden desplazarse y comportarse como ondas de energía (en vacío). La preparación de la muestra es similar a la utilizada en Electrónica de Barrido. Proporciona imágenes en un solo plano de información referente a la estructura celular o partículas muy pequeñas.

Referencias:

-KARP, Gerald (2014). “Biología Celular y Molecular: Conceptos y Experimentos”. México, DF; Mc Graw Hill, Interamericana.

-NACHTIGALL, Werner, (2015). “Microscopía: Materiales, instrumental, métodos”. Barcelona: Omega.

-GONZALEZ, Sofía, (2017). “Guía de Microscopía Electrónica”. México: UNAM. Facultad de Estudios Cuautitlán

-YACAMAN, Miguel, (2016). “Microscopía Electrónica, una visión del microcosmos”. México. CONACyT: Fondo de Cultura Económica.