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LA CUANTIFICACIÓN DEL TOTAL DE FENOLES Y FLAVONOIDES CONTENIDOS, Y LA ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DE DIOCLEA REFLEXA

Enviado por   •  18 de Junio de 2018  •  1.954 Palabras (8 Páginas)  •  172 Visitas

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El contenido total de flavonoides

Se utilizó el método colorimétrico de aluminio para determinar el contenido total de flavonoides de Dioclea reflexa. Se pesaron 5 mg del extracto y se disolvió con 5 ml de 50% de metanol y 1 ml de esta solución se añadido 0,7 ml de 5% (w / w) NaNO2 y 10 ml de 30% (v / v) de etanol. Esta mezcla se agitó durante 5 minutos y 0,7 ml de 10% AlCl3 (w / w) que se añade a la misma y se agitó durante 6 minutos. Se añadieron 5 ml de 1 mol / l de NaOH a la mezcla y diluido a 25 ml con 30% (v / v) de etanol. La mezcla se dejó en reposo durante 10 minutos y la absorbancia medida a 500 nm utilizando un espectrofotómetro UV. La quercetina fue utilizado como el estándar y el total de flavonoides el contenido se expresa como equivalentes de quercetina en mg / g de extracto.

Contenido de fenoles totales

El contenido de fenoles totales del extracto metanólico se determinó usando el método de Folin-Ciocalteu. 5 mg del extracto se pesó y se disolvió con 5 ml de 50% de metanol usando un mezclador de vórtice. 0,5 ml de esta solución fue pipeta en un tubo de ensayo y 3,5 ml de agua destilada, 0,25 ml de reactivo de Folin-Ciocalteu añadido a la misma. Eso se dejó incubar durante 8 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se añadió 1 ml de 20% Na2CO3 y se dejaron incubar durante 2 horas. La absorbancia se midió a una longitud de onda de 765 nm frente a un blanco de reactivo usando un UV espectrofotómetro. El ácido gálico se utiliza como el estándar y el contenido fenólico total del extracto expresó en equivalentes de ácido gálico mg / g de extracto.

NOTA: Las tablas de resultados están en el archivo original

Tamizaje fitoquímico

El resultado de la detección fitoquímico reveló presencia de flavonoides, esteroides y terpenoides y ausencia de alcaloides, saponinas, taninos y glucósidos de antraquinona en el extracto metanólico mientras que ninguno era encontrado en el extracto de n-hexano (Tabla 1).

Ensayo antibacteriano

El extracto de n-hexano no presenta ninguna actividad antibacteriana mientras que el extracto metanólico era activo contra K. pneumoniae y P. aeruginosa (Tabla 2).

fenoles totales y el contenido de flavonoides

La determinación espectroscópica del contenido de fenoles totales del extracto de hoja de metanol se llevó a cabo utilizando el reactivo de Folin-Ciocalteu y ácido gálico lineal curva estándar (y = 0.023x + 0,294, R2 = 0,960. La contenido en flavonoides se determinó utilizando el ensayo colorimétrico de aluminio. La quercetina se utilizó como el estándar con una curva estándar (y = 0.012x - 0,011, R2 = 0,992). El contenido fenólico total obtenido fue de 41. 58 ± 0,15 mg GAE / g de extracto mientras que el contenido total de flavonoides obtenidos en este estudio fue de 29,82 ± 0,23 mg QRT / g de extracto (Tabla 3).

Discusión

Los investigadores han descubierto que las plantas son reservorios de compuestos químicos algunos de los cuales tienen muestran propiedades quimioterapéuticos. Estas propiedades han ayudado a su creciente demanda en la industria farmacéutica y las industrias cosméticas. Los fitoquímicos identificados en el extracto de hoja de metanol de Dioclea reflexa eran flavonoides, esteroides y terpenoides. Estos fitoquímicos han demostrado repetidamente poseer antimicrobianos, antivirales, antifúngicas y otra properties16 farmacológica. Este resultado está en contraste con el resultados de Ogundare y Olorunfemi (2007) 17 que mostraron que el extracto metanólico de las hojas de las plantas contienen alcaloides, taninos, glucósidos y fenoles. Esto podría ser como resultado de tanto climáticas, ambientales y factores del suelo; ya se recogió su material vegetal de la parte occidental de Nigeria, mientras que la nuestra era por cobrar desde la parte central del norte de Nigeria. Esto también resultó en la discrepancia en la actividad antibacteriana de la extracto de hoja de metanol. Mientras que la nuestra era activo contra Kliebseilla pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa y inactivo contra E. coli, Staphylococcus aureus y Proteus vulgaris; la suya era activo contra Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Kliebsella pneumoniae, typii Samonella, Proteus mirabilis y E. coli, y inactivo contra Pseudomonas aeruginosa. La comparación de la actividad antibacteriana de la extracto de hoja de methanoilc a la de estreptomicina, se observó el extracto de hoja a ser más activos contra Kliebseilla pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa que el antibiótico estándar utilizado (estreptomicina). Los extracto de hoja de la planta metanólica se muestra un tener una cantidad razonable de compuestos fenólicos y flavonoides. Los Compuestos fenólicos y flavonoides son muy importantes fitoquímicos de planta que tiene varios grupos hidroxilo. Estas grupos hidroxilo se han demostrado para ser responsable de estos productos químicos capacidad de captación de radicales. Esta capacidad hace que actúen como antioxidantes. Ellos se han encontrado para demostrar los efectos inhibidores sobre la inflamación, alergias, mutagénesis y la carcinogénesis en humans18-25, impiden la descomposición de hidroperóxidos en radicales libres y ralentizar la velocidad de formación de dieno conjugado, retardar la degradación oxidativa de los lípidos de ese modo mejorar el valor nutricional y la calidad de comida. Sin embargo, se observó que los antioxidantes sintéticos poseen mayor actividad que la antioxidante natural. En el ensayo Folin- Ciocalteu, presente en el molybdotungstate reactivo oxida los compuestos fenólicos para producir un producto coloreado que absorbe alrededor de 745 a 750 nm. Este método es no es específica de polifenoles solo, pero otros compuestos hidroxilo presentes en el extracto puede causar interferenciaspor reacción con el reactivo dando así un contenido fenólico total de falsa del extracto. Por lo tanto, la la actividad antioxidante del extracto puede ser una combinación de los efectos de los polifenoles y otros antioxidantes compuestos presentes en el extracto.

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