LA OBTENCIÓN DE EXTRACTOS DE CEPAS DE PLEUROTUS CON CAPACIDAD DE INHIBICIÓN DE CEPAS DE FUSARIUM Y TRICHODERMA

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Estas micotoxinas pueden contaminar la cadena alimentaria a través de la infección de productos agricolas destinados al consumo humano o de animales domésticos. Más de 50 especies de Fusarium producen micotoxinas que contaminan el grano de cereales en desarrollo, como trigo y maíz (Cornely, 2008; Schaafsma y Hooker, 2007).

La producción de micotoxinas en los granos de maíz se ve afectada por tres factores principales: las condiciones ambientales, las prácticas agrícolas y la susceptibilidad de los genotipos utilizados (Edwards, 2004). Con el objetivo de reducir el impacto de las micotoxinas en los granos de los cereales para consumo humano, se han realizado diversas investigaciones enfocadas a controlar el desarrollo micelial o la síntesis de los compuestos tóxicos, sin la utilización de productos químicos, ya que se ha observado que los hongos desarrollan rápidamente una resistencia a los mismos (Brent y Hollomon, 1998). [pic 3]

2. JUSTIFICACIÓN

En virtud de la gran importancia que tienen los hongos tanto ecológica como económica y las afectaciones que algunos de estos causan a cereales como el trigo y el maíz, y considerando la escasez de trabajos científicos sobre este tema en México es que se plantea estudiar si las cepas Pleurotus Pulmonarius y Pleurotus ostreatus pueden inhibir el crecimiento de cepas de Fusarium graminearum y Trichoderma viride.

Con esta investigación de la obtención del extracto de la Cepa Pleurotus pulmonarius IE-115, Cepa Pleurotus ostreatus IE-38 y Cepa Pleurotus ostreatus IE-728 se busca limitar el crecimiento de dos cepas de Fusarium graminearum y Trichoderma viride. Este extracto es para limitar los nutrientes de estos basidiomas Fusarium y Trichoderma, contaminantes que como se sabe causan mucho daño a lo que son algunos cereales, particularmente el maíz.

3. OBJETIVO GENERAL

Obtener extractos de basidiomas de cepas de Pleurotus y estudiar su efecto en el crecimiento de cepas de Fusarium graminearum y Trichoderma viride.

3.1 OBJETIVO ESPECIFICO

Estudiar el efecto de la concentración de extractos de las cepas IE-115 Pleurotus pulmonarius IE-38 Pleurotus ostreatus y IE-38 Pleurotus ostreatus y medir la biomasa en medio líquido.

Estudiar el efecto de la concentración de las cepas de Fusarium graminearum y Trichoderma viride.

4. PROBLEMAS A RESOLVER

- Obtención de extracto de diferentes cepas de basidiomas Pleurotus

-Mediante el hongo Pleurotus se pretende limitar el crecimiento de hongos tóxicos para los granos.

-obtener la recuperación de la biomasa con buenos resultados en las tres cepas de Pleurotus y que estas limiten a las dos cepas toxicas para los granos.

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5. MATERIALES Y METODOS

Esta investigación se llevó a cabo en el Instituto de Ecología, donde se busca inhibir ciertos hongos tóxicos para algunos granos como el maíz y el trigo, mediante hongos comestibles.

5.1 Obtención de basidiomas

Los basidiomas que se obtuvieron son de las cepas Pleurotus, que se encuentran en la planta de hongos del Instituto de Ecología (INECOL), donde se hacen muchas investigaciones sobre su comportamiento, producción y diversos ámbitos donde son manipulados.

5.1.1 Preparación de inoculo

Para llevar a cabo la preparación del inoculo se utilizó semilla de sorgo de la comercial, que fue lavada y esterilizada en frascos de 400 gr a una presión de 15 libras, durante 1 hora y media.

Se llevaron a la cámara de flujo donde se inocularon con la cepa Pleurotus y se incubaron a 21 °C por un periodo de 30 días

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Como se muestra en la figura 1, los frascos de semilla de sorgo fueron invadidos de micelio al mes de haberse incubado

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5.1.2 Preparación y siembra del sustrato

El sustrato que se utilizo fue la paja, previamente pasteurizada para lograr el crecimiento de la cepa deseada y no de una posible contaminación.

La siembra se llevó a cabo en el campus III del BIOMIMIC, perteneciente al INECOL. Tomándose bolsas de 4 kilogramos de paja, agregándole inoculo de la cepa Pleurotus.

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5.1.3 Incubación de las muestras

Cada una de las bolsas sembradas con diferentes cepas se llevaron a incubar por un periodo de 45 días a una temperatura ambiente. Estas fueron rotuladas, selladas y separadas por cepas para ver su desarrollo.

Pasados los primeros 15 días a cada una de las bolsas se les hacen unas pequeñas aberturas, dos a los costados y cuatro en frente en forma de x, para que empiecen a respirar y el micelio invada más rápido, pero esto debe hacerse con mucho cuidado pues pueden existir aberturas que ocasionen contaminación.

5.2 Obtención del extracto y sus fracciones

Para obtener un extracto y definir las fracciones primero se debe ver si la producción de basidiomas fue efectiva y a continuación se explicará el procedimiento.

5.2.1 Cosecha y preparación de los basidiomas

Teniendo ya los basidiomas listos estos fueron cortados a lo largo, se metieron en servilletas de cocina y en bolsas de poli papel. Estos fueron colocados a refrigerarse a 20 °C durante 7 días. [pic 10]

Esto se hizo para lograr que dichos basidiomas se congelaran totalmente y se conservaran mucho mejor.

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Cuando los basidiomas quedaron congelados, estos fueron introducidos al liofilizador, un método que lo que hace es como la sublimación pasa del estado sólido al gaseoso sin pasar por el estado líquido. Esto lo que genera que nuestros basidiomas previamente congeladas queden secos y su tiempo de permanencia en el liofilizador es de 48 horas.

Al tener ya secos